鹿茸干细胞外泌体miRNA-145调控炎症软骨细胞的作用
文献类型: 中文期刊
作者: 蒋一頔;赵建伟;周珏;吕金朋;王大涛;李勋胜;岳志刚;崔博;孙红梅
作者机构:
关键词: 骨关节炎;外泌体;鹿茸干细胞;microRNA;miRNA-145;软骨细胞;SOX9;转化生长因子β1(TGF-β1);SMAD3
期刊名称:中国组织工程研究
ISSN: 2095-4344
年卷期: 2025 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; 科技核心(2024版)
摘要: 背景:近年来,干细胞外泌体对关节炎的治疗作用备受关注,课题组前期已发现鹿茸干细胞外泌体对软骨缺损有明显修复作用,但其作用机制尚不清楚。目的:探究鹿茸干细胞外泌体中miRNA-145在关节炎软骨细胞中的调控作用和机制。方法:通过慢病毒载体系统构建过表达miRNA-145的鹿茸干细胞,并通过超速离心法提取外泌体。将大鼠软骨细胞分为5组:空白对照组、白细胞介素1β组、外泌体+白细胞介素1β组、空载体转染外泌体+白细胞介素1β组、miRNA-145转染外泌体+白细胞介素1β组,除空白对照组外,其余4组用白细胞介素1β诱导软骨细胞24 h建立炎症细胞模型,然后分别用相应外泌体处理,采用CCK-8检测细胞增殖水平,划痕实验检测细胞迁移能力,qPCR、Western blot实验检测软骨细胞相关基因和蛋白表达水平。结果与结论:(1)外泌体呈现典型椭圆形双层囊泡样结构,直径在50-150 nm之间,均表达外泌体的经典标志物CD9、ALIX和TSG101,且不表达Calnexin;(2)鹿茸干细胞外泌体可提高炎症环境下软骨细胞活力、细胞迁移率、Ⅱ型胶原A1、转化生长因子β1、SMAD3、SOX9 mRNA和蛋白表达水平,降低基质金属蛋白酶13 mRNA表达水平;(3)miRNA-145过表达使炎症环境下软骨细胞活力、细胞迁移率、Ⅱ型胶原A1、转化生长因子β1、SMAD3、SOX9 mRNA和蛋白表达下降,基质金属蛋白酶13 mRNA表达上升;(4)结果表明,鹿茸干细胞外泌体可以通过转化生长因子β1/SMAD3信号通路促进软骨细胞修复,miRNA-145过表达后抑制软骨细胞修复。
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