粮油产品T-2毒素单克隆抗体研制及应用
文献类型: 中文期刊
作者: 张亮;李培武;张奇;张文;杨青青;朱建国
作者机构:
关键词: T-2毒素;单克隆抗体;间接竞争ELISA;检测
期刊名称:中国油料作物学报
ISSN: 1007-9084
年卷期: 2015 年 37 卷 05 期
页码: 724-729
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 以T-2毒素与琥珀酸为原料,通过琥珀酸酐法合成出T-2毒素半抗原T-2HS,再通过活泼酯法,将T-2毒素半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)共价偶联,合成出T-2毒素人工抗原T-2HSBSA和T-2HS-OVA,以T-2HS-BSA作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合和阳性筛选,共获得4株T-2毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别是1D6、2A8、2C5和4G3。其中2C5分泌的抗体灵敏度(IC50)最高,达0.13μg/kg,特异性强,与HT-2的交叉反应率仅为4%,与FB1、DON、ZEN无交叉反应。进一步利用该抗体建立了间接竞争ELISA检测方法,最低检测限为0.015μg/kg,检测范围(IC20~IC80)为0.05~57.6μg/kg,该方法对大豆、玉米、花生等粮油产品的检测范围为0.5~576μg/kg,在线性范围内加标回收率为93.5%~107.5%。本研究建立的检测方法可用于大豆、玉米、花生等多种粮油产品中T-2毒素的检测。
分类号: TS207.3
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