文献类型： 中文期刊
作者： 郭子强;李佳乐;罗梦;唐银保;帅文娜;李丽薇;周艳君;童武;姜一峰;童光志;高飞
作者机构：
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;病毒活载体;IL15蛋白;多克隆抗体
期刊名称：中国动物传染病学报
ISSN： 1674-6422
年卷期： 2024 年
页码：
收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）
摘要： 本研究旨在制备IL15多克隆抗体，并使用质粒pCDNA3.1-IL15和重组病毒rPRRSV-IL15进行验证。首先构建原核表达质粒pET-IL15，经IPTG诱导后，利用SDS-PAGE对重组蛋白进行表达鉴定和反应原性分析，利用纯化后得到的IL15重组蛋白三次免疫兔后制备多克隆抗体。同时，利用反向遗传操作技术将IL15基因插入高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株vHuN4-F112的感染性克隆中，拯救获得能够稳定表达IL15蛋白的重组病毒rPRRSV-IL15。接着，将表达IL15蛋白的质粒pCDNA3.1-IL15转染HEK 293T细胞，rPRRSV-IL15感染MARC-145细胞和PAMs后，用上述制备的抗体进行验证。结果显示，制备的IL15多克隆抗体具有良好的反应性和特异性，能够识别和结合转染了pCDNA3.1-IL15质粒和感染了rPRRSV-IL15重组病毒的细胞中的IL15蛋白，为进一步研究IL15蛋白的生物学功能以及其在免疫调节中的作用奠定了重要基础，重组病毒rPRRSV-IL15也是新型免疫增强型PRRSV弱毒疫苗研制的一种尝试。
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