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瓜果上主要实蝇类害虫PCR-RFLP分子鉴定技术的建立及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 吴明月;王文璐;王少丽;张友军;谢文

作者机构：

关键词： 瓜实蝇; 南亚果实蝇; 橘小实蝇; 线粒体; 分子鉴定; 限制性内切酶

期刊名称：应用昆虫学报

ISSN： 2095-1353

年卷期： 2021 年 58 卷 05 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： 【目的】建立一种针对实蝇幼虫快速鉴定的技术方法,并应用该技术以明确我国瓜果上主要实蝇类害虫的优势种。【方法】以我国瓜果蔬菜上危害最为严重的瓜实蝇Bactrocera cucurbitae（Coquillett）、南亚果实蝇Bactrocera tau Walker和橘小实蝇Bactrocera dorsalis（Hendel）为对象,基于3种实蝇种间存在线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ因子（mt COⅠ）基因的序列差异,利用3种限制性内切酶SapⅠ、BsmⅠ和SacⅠ酶切识别这些差异序列的特异性酶切位点,根据酶切后mtCOⅠ基因片段大小不同,对3种实蝇进行快速的鉴定识别,并进一步应用此技术对来自我国7省11市的7种瓜菜和2种水果上的21份实蝇幼虫样本进行鉴定。【结果】通过单独或组合酶切的方式建立了一套针对瓜实蝇、南亚果实蝇和橘小实蝇的PCR-RFLP快速分子鉴定技术,并将此方法应用于田间监测。田间鉴定结果表明,湖北、湖南、浙江等地区危害瓜菜的实蝇主要是南亚果实蝇,广东、广西、海南等地区瓜菜上的实蝇种类主要是瓜实蝇,且瓜实蝇和南亚果实蝇存在寄主重叠现象,云南危害火龙果和芒果等水果上的实蝇主要是橘小实蝇。【结论】本研究建立的瓜实蝇、南亚果实蝇和橘小实蝇的识别鉴定方法,因不受虫体、虫态的影响,且具有低成本、高效、快速、重复性好的特点,适用于田间瓜果上实蝇样本的快速诊断检测。依据田间鉴定结果,预测近年来瓜实蝇可能有逐渐向北扩散的趋势。

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