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山羊环鸟苷酸-腺苷酸合成酶的原核表达及其酶活性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 韦雨松;张艳;田慧慧;翟军军;陈国华;房永祥;景志忠;屈雷;米晓云;何小兵

作者机构：

关键词： 环鸟核苷酸-腺苷酸合成酶;环鸟苷酸-腺苷酸;原核表达;蛋白纯化;酶活性

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2024 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 为了研究山羊环鸟核苷酸-腺苷酸合成酶（gcGAS）的生物学功能，通过构建含gcGAS基因的pET28a-gcGAS原核表达载体，在Rosetta(DE3)表达菌中进行表达，经纯化获得了纯度较高的重组gcGAS蛋白，并测定其酶促活性。结果显示，在优化表达条件下，实现了重组gcGAS蛋白的可溶性表达，其能以ATP和GTP为底物合成了第二信使分子2′3′-cGAMP。结论，本研究原核表达的可溶性重组gcGAS蛋白具有生物酶催化活性，这为后续gcGAS介导的抗病毒天然免疫机制研究及其应用开发奠定了一定的基础。

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