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基于MS2噬菌体的小反刍兽疫装甲RNA质控品的研制

文献类型： 中文期刊

作者： 刘丹;李慧彤;张博源;高建帅;蒋卉;范学政;张广智;郜卫华;丁家波;熊涛;沈青春

作者机构：

关键词： 小反刍兽疫(PPR);MS2噬菌体;装甲RNA;病毒样颗粒

期刊名称：中国兽医杂志

ISSN： 0529-6005

年卷期： 2025 年 61 卷 05 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为了研制安全稳定的小反刍兽疫病毒（PPRV）核酸检测质控品，本试验将PPRV检测靶标基因N、MS2噬菌体衣壳蛋白（CP）和成熟酶蛋白A基因序列插入p ET28a构建重组质粒p ET-CPA-PPR，经表达纯化、去除残余核酸和实时荧光定量PCR鉴定后制备成PPRV装甲RNA质控品，并对其进行电子显微镜观察、定量、耐核酸酶检验、均匀性和稳定性检验，以评估其作为标准物质的可能性。结果显示，p ET-CPA-PPR经诱导表达和纯化后形成直径为23～28 nm、大小均一、已包封PPRV检测靶标基因N的装甲RNA颗粒，浓度为2.24×109 copies/μL，可以有效抵抗核酸酶降解作用，均匀性良好且在（37±1）℃条件下可稳定保存至少30 d。结果表明，基于MS2噬菌体制备的PPRV装甲RNA拷贝数高，均匀性和稳定性良好，能够为PPRV核酸检测提供安全可靠的标准化参考物质。

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