流产布鲁氏菌BCSP31基因在大肠杆菌中的可溶性高效表达
文献类型: 中文期刊
作者: 曹小安;邱昌庆;周继章;蔺国珍
作者机构:
关键词: 流产布鲁氏菌;BCSP31基因;克隆;可溶性表达
期刊名称:吉林农业大学学报
ISSN: 1000-5684
年卷期: 2007 年 29 卷 06 期
页码: 97-100
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 设计1对引物,突变除去布鲁氏菌BCSP31(细胞表面蛋白31)基因的N端信号肽氨基酸序列,经NotⅠ和EcoRⅠ酶切后与相同处理的表达载体pGEX-4T-1连接,转化BL21(DE3)感受态细胞。酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性克隆,测序证明其阅读框完全正确。用IPTG诱导表达构建成功的阳性克隆,对产物进行SDS-PAGE和Western-blotting检测,发现表达产物出现预期分子量57 kD的融合蛋白,该蛋白能与牛流产布鲁氏菌阳性血清发生反应,进一步证明目的蛋白主要以可溶性形式存在,表达量约占总蛋白的40%,应用GST琼脂糖凝胶FF纯化可得到纯度较高的表达产物。
分类号: S852.61
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