猪带绦虫TSO18基因工程疫苗的研制
文献类型: 中文期刊
作者: 才学鹏;袁改玲;郑亚东;景志忠;骆学农;贾万忠;李辉;丁军涛
作者机构:
关键词: 猪囊虫病;疫苗侯选基因TSO18;免疫效果
期刊名称:全国人畜共患病学术研讨会论文集
ISSN:
年卷期: 2006 年
页码: 4
收录情况: CSCD
摘要: 本研究选用近年来发展最快和最具潜能的真核表达系统-毕赤酵母,构建了重组表达载体pPIC9K-TSO18,并用G418抗性梯度筛选法,获得多拷贝重组菌株。对重组菌株利用甲醇进行诱导分泌表达,SDS-PAGE和Western-blot分析结果表明,诱导表达的培养上清中表达出大小为12ku和16ku具有反应活性的重组蛋白。用糖苷内切酶H(Endo-H)对TSO18蛋白分析后表明,目的蛋白进行了适度的糖基化修饰,与理论分析一致。通过对发酵条件如pH、温度和溶氧水平等的调整,重组毕赤酵母在5L发酵罐高细胞密度发酵中表达量高达2.54g/L,用薄层扫描分析,目的蛋白约占培养上清蛋白总量的80%以上。表达的...
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