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牛疱疹病毒I型糖蛋白E（gE）可溶性表达及其反应原性分析

文献类型： 中文期刊

作者： 杨晨;孙续;丁学智;杨峰

作者机构：

关键词： 牛传染性鼻气管炎;gE蛋白;原核表达;载体构建

期刊名称：中兽医医药杂志

ISSN： 1000-6354

年卷期： 2023 年

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收录情况： 农林核心（2020版）

摘要： 为探索牛传染性鼻气管炎诊断新技术，本研究以GeneBank公布的牛疱疹病毒I型（BoHV-Ⅰ，NC＿001847.1）基因序列为参考，预测并优化了BoHV-Ⅰ的gE蛋白胞外区密码子序列。优化后的序列长度为1 275 bp，5’端和3’端分别添加限制性酶切位点SacⅠ和Hind Ⅲ后克隆至载体pUC19，进而构建原核表达载体pET-SUMO-gE，将其转入大肠杆菌BL21-CodonPlus（DE3）-RIL中表达重组蛋白，使用Ni-NTA亲和柱纯化重组蛋白。SDS-PAGE和Western blot检测结果证明，获得的牛疱疹病毒Ⅰ型gE胞外区重组蛋白大小约为70 kDa，有良好的水溶性和反应原性。该研究结果为gE特异性单克隆抗体的制备及后续诊断试剂盒的研发奠定了基础。

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