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犬干扰素α1的原核表达与抗病毒活性分析

文献类型: 中文期刊

作者: 樊益铭;程松;张子晨;毕庄莉;张淼;周婷;胡名星;罗健;杜庆庆;朱英奇;刘光清

作者机构:

关键词: 犬干扰素α1;原核表达;干扰素刺激基因(ISGs);抗病毒活性

期刊名称:中国动物传染病学报

ISSN: 1674-6422

年卷期: 2026 年

页码:

收录情况: 北大核心(2023版) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)

摘要: 干扰素是一类具有广谱抗病毒、抗肿瘤及免疫调节功能的活性蛋白。本研究通过密码子优化合成犬干扰素α1(CaIFN-α1)基因,构建原核表达载体pET-28a-CaIFN-α1,转化至大肠杆菌中诱导表达。SDS-PAGE与Western blot鉴定结果显示,目的蛋白成功表达,并主要以包涵体形式存在;经纯化与复性后,获得浓度为0.284 mg/mL的重组CaIFN-α1蛋白。进一步利用该纯化蛋白刺激MDCK细胞,RT-qPCR分析表明,其可显著上调多个干扰素刺激基因(ISGs)的转录水平,包括PKR、IFIT1、IFIT2、MX1、ISG15和RSAD2。采用细胞病变抑制实验评估该蛋白在MDCK细胞上对抗VSV-GFP病毒的活性,结果显示其抗病毒效价为1.18×106U/mg,表明所制备的CaIFN-α1具有良好抗病毒活性。本研究为犬用干扰素制剂的开发提供了候选材料,也为进一步探讨CaIFN-α1的生物学功能奠定了基础。

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