数字农科院2.0

单核细胞增生李斯特菌sRNA伴侣分子hfq的基因克隆、表达及纯化

文献类型： 中文期刊

作者： 彭叶龙;乔军;孟庆玲;谢堃;陈诚;刘田莉;马玉;才学鹏;陈创夫

作者机构：

关键词： 单核细胞增生李斯特菌;hfq基因;sRNA伴侣分子;克隆;表达;纯化

期刊名称：华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2014 年 29 卷 05 期

页码： 83-87

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为克隆、表达单核细胞增生李斯特菌sRNA分子伴侣蛋白hfq基因,并纯化重组蛋白,通过PCR的方法从单核细胞增生李斯特菌基因组DNA中扩增出hfq基因,将扩增产物克隆于pMD18-T载体中,测序验证后,再将hfq基因亚克隆至表达载体pET-32a(+)中,成功构建pET-32a(+)-hfq原核表达载体。然后,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,通过IPTG进行诱导表达,对表达蛋白进行可溶性分析,并采用Ni-NTA纯化目的蛋白。结果显示:克隆的hfq基因全长234 bp,编码77个氨基酸,通过SDS-PAGE可以检测到27 kDa的蛋白特异性条带;并从上清中纯化得到了Hfq融合蛋白。为进一步研究该蛋白的生物学功能奠定了基础。

分类号： S852.61`Q78

  • 相关文献

[1]ncRNA伴侣分子hfq基因缺失对单核细胞增生李斯特菌环境适应能力的影响. 卢海亭,乔军,孟庆玲,彭叶龙,陈诚. 2015

[2]分子伴侣hfq基因缺失对单核细胞增生李斯特菌毒力及生物被膜生成的影响. 卢海亭,乔军,孟庆玲,彭叶龙,陈诚,刘田莉,才学鹏,陈创夫. 2017

[3]猪MHC-Ⅰ α生物素化序列融合基因的构建、表达与纯化. 肖一红,刘光亮,王群,童铁钢,白宇,孟庆文,吴东来. 2008

[4]马β_2-微球蛋白基因的克隆及其在大肠埃希氏菌中的高效表达与纯化. 童铁钢,刘光亮,徐树兰,王群,肖一红,孟庆文,吴东来. 2005

[5]猪MHC-Ⅰa生物素化序列融合基因的构建、表达与纯化. 肖一红,刘光亮,王群,童铁钢,白宇,孟庆文,吴东来. 2007

[6]PBD1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达. 郭奎,杨兴武,张鸿鑫,赵宇,郑慧华,杨明凡,陈红英. 2018

[7]猪MHC-Ⅰα生物素化序列融合基因的构建、表达与纯化. 肖一红,刘光亮,王群,童铁钢,白宇,孟庆文,吴东来. 2008

[8]马白细胞介素18成熟蛋白(mEIL-18)基因在大肠埃希氏菌中的高效表达与纯化. 童铁钢,刘光亮,白宇,肖一红,王群,李少英,孟庆文,吴东来. 2007

[9]马β2-微球蛋白基因的克隆及其在大肠埃希氏菌中的高效表达与纯化. 童铁钢,刘光亮,徐树兰,王群,肖一红,孟庆文,吴东来. 2005

[10]单增李斯特菌hfq基因的克隆及分子特征分析. 彭叶龙,乔军,孟庆玲,谢堃,陈诚. 2014

[11]单核细胞增生李斯特菌新型内化素lmo0549的分子特征及其表达. 王立霞,孟庆玲,乔军,郭晶,伍晔晖,才学鹏,蔡扩军,王登峰. 2019

[12]单核细胞增生李斯特菌新型转录调控因子Lmo2672分子特征及其系统进化分析. 李杰,孟庆玲,乔军,张星星,王晓婷,李妍,张国武,蔡扩军,才学鹏. 2019

[13]HCVNS5B蛋白表达、纯化及活性测定. 张秀杰,李莉,欧阳红生. 2008

[14]鸡贫血病毒衣壳蛋白的表达纯化及多克隆抗体制备. 王晓艳,文刚,高玉龙,高宏雷,王笑梅. 2006

[15]福氏志贺菌2aAcrA蛋白的表达、纯化及初步结晶. 魏小娟,张继瑜,王松泰,黄娇娇,李剑勇,周绪正,牛建荣,李金善,李冰. 2009

[16]鸡MHCIα-生物素化序列融合基因的构建、表达及纯化. 刘光亮,童铁钢,王群,肖一红,孟庆文,吴东来. 2006

[17]猪圆环病毒Ⅱ型修饰Cap蛋白基因的原核表达及纯化. 张锦秀,晁生玉,史利军,候绍华,李刚. 2009

[18]单核细胞增多性李氏杆菌野毒株InlB的分子特征及其表达和纯化研究. 孟庆玲,乔军,才学鹏,景志忠,贾桂珍. 2007

[19]Asia1型口蹄疫病毒VP1基因的克隆、原核表达及纯化. 独军政,常惠芸,丛国正,林彤,邵军军,魏小娟,刘在新,谢庆阁. 2005

[20]牛传染性鼻气管炎病毒gB基因的截短表达与间接ELISA诊断方法的建立. 李兆利,薛飞,朱远茂,王延辉. 2006

作者其他论文 更多>>