稳定表达猪流行性腹泻病毒S蛋白Flp- InTM CHO细胞系的构建
文献类型: 中文期刊
作者: 邓小莺;王俊娜;马翮斯;虞凌雪;李国新
作者机构:
关键词: 猪流行性腹泻病毒;S蛋白;CHO细胞系;稳定表达
期刊名称:中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2024 年
页码:
收录情况: 北大核心(2020版) ; ; 科技核心(2023版) ; ; 农林核心(2020版)
摘要: 猪流行性腹泻病毒(PEDV)是引起猪病毒性腹泻的重要病原,在世界范围内广泛流行,给全球养猪业带来了巨大的经济损失。PEDV S蛋白含丰富的抗原表位,能够诱导机体产生针对PEDV的中和抗体,被认为是研制PEDV亚单位疫苗的主要靶标抗原。构建稳定表达PEDV S蛋白的细胞系,可为抗PEDV基因工程疫苗及S蛋白功能研究奠定基础。本研究构建了包含S蛋白全长基因的质粒pCDNA5/FRT-S和包含S蛋白胞外结构域的质粒(去除跨膜结构域和胞内区)pCDNA5/FRT-S(-Tm),把两种质粒分别转染CHO细胞,经抗性筛选获得了稳定表达目标蛋白的Flp-InTM CHO细胞系。IFA结果显示,两种重组细胞系传代至第10代仍能稳定表达目的蛋白。这些细胞系的建立为研制抗PEDV新型亚单位疫苗奠定了良好的基础。
分类号:
- 相关文献
[1]猪流行性腹泻病毒S蛋白受体结合域的分析. 孙东波,陈建飞,时洪艳,申识川,吕茂杰,范秀萍,陈洪岩,冯力. 2009
[2]猪流行性腹泻病毒S蛋白中和表位区单克隆抗体的制备与鉴定. 孙东波,冯力,时洪艳,陈建飞,崔晓辰,佟有恩. 2007
[3]PEDV S蛋白B细胞抗原表位的筛选和鉴定. 孙东波,朗洪武,时洪艳,陈建飞,崔晓辰,王承宝,佟有恩,冯力. 2007
[4]猪流行性腹泻病毒S蛋白诱导内质网应激的研究. 马艳龙,薛美,符芳,尹灵丹,郭珊珊,冯力,刘平黄. 2018
[5]猪流行性腹泻病毒YT1401株分离鉴定及分子进化分析. 丁光明,王彬,肖鹏,张宸语,刘光亮,温建新. 2017
[6]PEDVS蛋白B细胞抗原表位的筛选和鉴定. 孙东波,朗洪武,时洪艳,陈建飞,崔晓辰,王承宝,佟有恩,冯力. 2008
[7]用噬菌体随机肽库筛选SARS冠状病毒S蛋白单克隆抗体2C5的模拟表位. 华荣虹,吴东来,童光志,王云峰,田志军,周艳君. 2006
[8]SARS-CoV S蛋白抗原表位富集区的表达与初步应用. 华荣虹,童光志. 2007
[9]基于S蛋白的犬冠状病毒间接ELISA检测方法的建立与应用. 曹海旭,胡博,李虹晔,李昀真,代昕宇,张成琪,李双双,张海玲,廉士珍,白雪. 2022
[10]SARS-CoVS蛋白抗原表位富集区的表达与初步应用. 华荣虹,童光志. 2007
[11]猪德尔塔冠状病毒S蛋白单克隆抗体的制备与鉴定. 范前进,刘秋歌,石达,王潇博,张家林,汤荣锋,陈建飞,冯力. 2021
[12]表达PEDV S蛋白优势抗原区域的重组PRRSV活载体疫苗株的鉴定. 劳梦琴,刘瑞琳,陈鹏飞,黄世静,于家荣,朱钧锐,孙祁,虞凌雪,高飞,姜一峰,童武,刘长龙,李丽薇,于海,童光志,周艳君. 2022
[13]逆转录病毒载体介导的T7RNA聚合酶在猪源细胞PK15及SK6中的稳定表达. 吴锦艳,田宏,郑海学,陈妍,靳野,尚佑军,刘湘涛. 2011
[14]稳定表达外源TLR9基因的山羊胎儿成纤维细胞系的建立. 刘太安,房永祥,贾怀杰,马保华,何小兵. 2013
[15]稳定表达兔出血症病毒VPg蛋白RK-13细胞系的构建. 朱杰,谭永贵,郭慧敏,缪秋红,孟春春,李传峰,陈宗艳,刘光清. 2015
[16]稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒受体CD163的HEK293细胞系的建立. 牛军伟,郭龙军,谷伟红,黄明明,李忍,骆晓蕾,王玉娥. 2015
[17]鼠IFN-λ2 CHO细胞系建立及生物学活性的研究. 严玉兰,袁利学,刘洋,曹文雁,步雪峰,步志高,郑金旭. 2010
[18]腺病毒介导的人端粒酶反转录酶牙周膜细胞系的建立. 孙贵军,秦晓东,王世琴,胡慧珍,陆笑颜,金佳佳,吴生荣,何祥一. 2019
[19]牛朊蛋白在CHO/dhfr-细胞中的稳定表达. 丁耀忠,张杰,刘永生,陈豪泰,曾巧英,马丽娜,马艳平,杨生海,殷宏. 2009
[20]稳定表达流感病毒PR8 HA蛋白MDCK细胞系的建立及鉴定. 黄海碧,滕巧泱,王朝霞,戴晓光,张树梅,张旭,申之义,李泽君. 2010
作者其他论文 更多>>
-
非洲猪瘟病毒p17蛋白的哺乳动物细胞表达及鉴定
作者:乔思娜;赵款;刘佳晨;李国新;童武;周艳君;赵冉;童光志;高飞;李丽薇
关键词:非洲猪瘟病毒;p17蛋白;293i细胞;多克隆抗体
-
CSFV-ASFV-PRRSV多重PCR检测方法的建立
作者:门旭坤;孙婷婷;罗画叶;李爽;朱钧锐;蒋霁捷;孙祁;沈伟;张成鑫;陈超;张泽崧;姜志康;柳宇;高飞;李丽薇;刘长龙;周艳君;李国新;童光志;韩先杰;姜一峰
关键词:猪瘟病毒;非洲猪瘟病毒;猪繁殖与呼吸综合征病毒;多重PCR
-
猪德尔塔冠状病毒昆明小鼠感染模型的建立
作者:宋俊菡;王元红;邓小莺;王俊娜;虞凌雪;王斌;周艳君;童光志;李国新
关键词:猪德尔塔冠状病毒;昆明小鼠;动物模型
-
PRRSV强弱毒感染PAM和Marc-145细胞入胞途径差异的研究
作者:朱豪杰;高飞;徐晶晶;刘宇婷;童光志;姜一峰;李国新
关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒;入胞途径;巨胞饮;肌动蛋白
-
猪PCSK9单克隆抗体的制备及其在PRRSV感染过程中的应用
作者:张玉娇;刘长龙;姜一峰;虞凌雪;周艳君;赵款;李丽薇;曹云雷;童光志;高飞
关键词:PCSK9;单克隆抗体;PRRSV
-
猪源转录因子SP1 SYBR Green I 荧光定量PCR检测方法的建立
作者:沈奇;虞凌雪;高飞;刘长龙;周艳君;李国新;童光志;李丽薇;姜一峰
关键词:猪源SP1;荧光定量PCR;SYBR Green I
-
表达猪源GM-CSF重组PRRSV疫苗对同源高致病性毒株的免疫保护效力评价
作者:虞凌雪;姜一峰;杨莘;于海;周艳君;童武;高飞;李国新;刘长龙;郑浩;单同领;李丽薇;孔宁;童光志
关键词:rPRRSV-GM-CSF;免疫记忆细胞T淋巴细胞;杀伤性T淋巴细胞