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弓形虫含MFS结构域蛋白TGME49＿226020的基本生物学功能研究

文献类型： 中文期刊

作者： 马志雅;李婷婷;李文硕;王萌;朱兴全;张念章

作者机构：

关键词： 弓形虫;条件性缺失;MFS结构域;生物素诱导降解系统

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为探究弓形虫含主要协同转运蛋白超家族（MFS）结构域蛋白TGME49＿226020的基本生物学功能，利用CRISPR-Cas9技术结合生物素诱导的降解系统（mAID）分别构建弓形虫RH-TIR1和Pru-TIR1野生株的条件性缺失虫株RH-TIR1-TGME49＿226020-mAID 和Pru-TIR1-TGME49＿ 226020-mAID。间接免疫荧光试验结果显示，TGME49＿226020蛋白定位于细胞质，加入吲哚乙酸（IAA）后目的蛋白被成功降解。将IAA加入RH-TIR1-TGME49＿226020-mAID虫株的培养基中，与RH-TIR1野生株相比，条件性缺失虫株感染宿主细胞后噬斑减小（P<0.000 1）、入侵能力减弱（P<0.001）、细胞内复制能力减弱（P<0.001），但对逸出能力和弓形虫体内各细胞器的稳定性无影响。缓殖子转化试验结果显示，加入IAA降解后，RH-TIR1-TGME49＿226020-mAID虫株和Pru-TIR1- TGME49＿226020- mAID虫株的转化能力与相应野生株相比均显著减弱（P<0.001）。结论：TGME49＿ 226020为含MFS结构域的转运蛋白，降解后可影响弓形虫体外细胞内的正常生命活动，具体作用机制需进一步探究。

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