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马铃薯转化酶抑制子St-inh cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达和功能测定

文献类型： 中文期刊

作者： 成善汉;柳俊;宋波涛;谢从华

作者机构：

关键词： 马铃薯;转化酶抑制子;St-inh;克隆;功能测定

期刊名称：实验生物学报

ISSN： 0001-5334

年卷期： 2004 年 04 期

页码： 269-275

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用RT-PCR结合5’RACE方法从马铃薯(Solanum tuberosum L.)栽培种JH块茎中克隆了转化酶抑制子St-inh 全长cDNA。序列分析表明,St-inh 基因编码区全长663bp,编码221个氨基酸。将含St-inh 基因cDNA 的DNA 片段克隆到pET28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)后成功实现了表达。基因表达产物与马铃薯栽培品种(系)E1、JH 试管块茎以及番茄果实的转化酶提取物共孵育结果显示,转化酶活性分别下降了34.3%、21%和33.8%,说明St-inh 的翻译产物具有转化酶抑制子功能。BLAST 基因序列分析表明,St-inh 与Kunitz-type C 类基因序列同源性达95%以上,T-COF-FEE 氨基酸序列对比分析显示,该基因编码的蛋白质具有典型的Kunitz-type 结构域[L,I,V,M]-X-D-X-[E,D,N,T,Y]-[D,G]-[R,K,H,D,E,N,Q]-X-[L,I,V,M]-X(5)-Y-X-[L,I,V,M],因此,Sit-inh 基因可能为Kunitz-type 家族成员。

分类号： S532

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