柔嫩艾美耳球虫LZ株MIC-5基因的克隆与表达
文献类型: 中文期刊
作者: 孟庆玲;乔军;才学鹏;景志忠;田广孚;闫鸿斌
作者机构:
关键词: 柔嫩艾美耳球虫;微线蛋白5基因;克隆;表达
期刊名称:甘肃农业大学学报
ISSN: 1003-4315
年卷期: 2007 年 42 卷 06 期
页码: 14-18
收录情况: CSCD
摘要: 提取柔嫩艾美耳球虫兰州株孢子化卵囊总RNA,运用RT-PCR技术扩增Et MIC-5基因片段进行测序,并克隆入大肠杆菌表达载体pET28a中进行诱导表达.结果表明,该基因片段长918 bp,编码306个氨基酸.与GenBank报道的柔嫩艾美耳球虫Houghton株MIC-5基因相比,核苷酸和推导的氨基酸序列同源性为99.2%和99.6%.在推导的MIC-5氨基酸序列中,第15~89、90~160、173~242和245~306位保守的cys残基形成4个Apple样结构域(A-domain),推测该蛋白可能在虫体与宿主细胞的黏附中起重要作用.转化重组质粒pETMIC-5的BL21(DE3)经IPTG诱导后,SDS-PAGE和western blot分析证实目的蛋白成功表达,重组蛋白的表达量可占菌体蛋白的15.2%.
分类号: S852.7
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