针对非洲猪瘟病毒K205R基因实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用
文献类型: 中文期刊
作者: 乔思娜;李丽薇;赵款;高飞;周艳君;姜一峰;童武;赵冉;童光志;李国新;董世山
作者机构:
关键词: 非洲猪瘟病毒(ASFV);K205R基因;荧光定量PCR;检测方法
期刊名称:中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2022 年
页码:
收录情况: 北大核心(2020版) ; 科技核心(2021版) ; 农林核心(2020版)
摘要: 为了快速、准确检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV),本文根据我国流行毒株ASFV SY18(GenBank ID:MH766894.1)已公布的K205R基因序列设计并合成特异性引物及探针,建立针对K205R基因的TaqMan荧光定量PCR检测方法。经过特异性试验、敏感性试验、重复性试验和临床样品检测试验分析显示,本文建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法Ct值与标准品在1×1011~1×102 copies/μL的范围内具有很好的线性关系,相关系数为0.998,斜率为-2.797,检测下限为102 copies/μL,与其它能引起相似临床症状的猪源病毒无交叉反应。重复性试验结果显示,组间与组内变异系数均小于1.53774%,重复性好。本方法适用于临床样品及本实验室构建的表达ASFV K205R基因的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的鉴定及检测,对ASFV快速检测及ASF早期诊断有重要意义。
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