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徐淮山羊Sox2基因启动子的克隆及其活性的初步分析

文献类型： 中文期刊

作者： 韦光辉;朱睿;刘志永;邱峰龙;张振韬;陈庭锋;张亚妮;李碧春;曹文广

作者机构：

关键词： Sox2基因;启动子;活性分析;5-aza-2′-deoxycytidine诱导;山羊

期刊名称：中国畜牧杂志

ISSN： 0258-7033

年卷期： 2014 年 50 卷 07 期

页码： 5-10

收录情况： 北大核心

摘要： 本研究旨在确定徐淮山羊Sox2基因启动子区域,找出该基因启动子的核心调控区,初步探讨Sox2基因的表达调控机制。根据GenBank已公布的绵羊Sox2基因的启动子序列,设计特异性PCR引物扩增Sox2基因的一系列启动子缺失片段,经酶切、测序及生物信息学分析,构建包含Sox2基因5′侧翼区一系列启动子缺失片段的pGL3-Sox2双荧光素酶表达载体,转染COS-7和GC1细胞,并进行5-aza-2′-deoxycytidine诱导,检测不同片段的启动子活性。结果表明:徐淮山羊Sox2基因5′侧翼区-1249—+49 bp区域的启动子活性最强(COS-7细胞),-1792—+49 bp区域活性最强(GC1细胞),-224—+49 bp区域为Sox2基因启动子基本活性区域。进一步研究发现,-484―-109 bp区域存在正调控元件,-755—-484 bp区域存在负调控元件。本实验通过构建包含Sox2基因启动子不同片段的重组报告基因载体并比较其转录活性,确定了Sox2基因启动子的核心区域。另外,5-aza-2′-deoxycytidine可以显著增强Sox2启动子的活性。为进一步研究Sox2基因的表达调控机制奠定了基础。

分类号： S827.2

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