数字农科院2.0

猪细小病毒NS1基因编码蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 帅文娜;郭子强;李佳乐;罗梦;李丽薇;周艳君;姜一峰;童武;童光志;李兆龙;高飞

作者机构：

关键词： 猪细小病毒;NS1蛋白;多克隆抗体;原核表达

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2024 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 本研究旨在制备PPV-NS1的多克隆抗体，并用猪细小病毒（PPV）和真核质粒pcDNA3.1(+)-NS1-3×Flag进行双重验证。首先将PPV的非结构蛋白编码基因NS1克隆至原核表达载体pETDuet，构建原核质粒pET-PPV-NS1。接着，将原核质粒pET-PPV-NS1转化至感受态E.coli BL21细胞中，经由1 mmol/L IPTG诱导以后，通过SDS-PAGE和Western-blot对NS1表达进行检测，结果表明，NS1基因在感受态细胞中得到了良好的表达。其次，将纯化后获得的NS1蛋白采用多点注射的方式对大白兔进行免疫，制备获得针对重组NS1蛋白的多克隆抗体。然后，将真核质粒pcDNA3.1(+)-NS1-3×Flag转染至HEK 293T细胞；同时PPV感染ST细胞后收取蛋白样品，用上述制备的NS1多克隆抗体进行验证。结果显示，制备的NS1多克隆抗体具有良好的反应性和特异性。

分类号：

  • 相关文献

[1]猪细小病毒2型VP2蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备. 帅文娜,李佳乐,郭子强,罗梦,李丽薇,周艳君,姜一峰,童武,童光志,李兆龙,高飞. 2025

[2]猪细小病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立与应用. 帅文娜,郭子强,李佳乐,罗梦,李丽薇,周艳君,姜一峰,童武,童光志,李兆龙,高飞. 2024

[3]基因Ⅰ型日本脑炎病毒NS1蛋白的多克隆抗体制备及鉴定. 柴风雪,田占成,杨吉飞,张鸿歌,牛庆丽,独军政,关贵全,殷宏. 2024

[4]乙型脑炎病毒NS1蛋白的可溶性表达与抗原性分析. 刘立科,陈振师,任玉红,步志高,华荣虹. 2012

[5]H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及在E.coli中的表达. 刘威龙,焦培荣,刘畅,阿合买提·买买提,陈化兰. 2007

[6]西尼罗病毒NS1蛋白特异性单克隆抗体的制备. 马健男,杨涛,徐青元,孙恩成,林燕,步志高,吴东来. 2010

[7]呼吸道合胞病毒NS1蛋白鼠单克隆抗体的制备应用. 陈娇,王亚娟,陈志华,茹毅,郑海学,裴晶晶. 2024

[8]猪细小病毒VP2蛋白主要抗原表位区的原核表达及检测PPV抗体的间接ELISA的建立. 范朋举,曹轶梅,卢曾军,张萌,孙普,付元芳,李平花,白兴文,包慧芳,陈应理,李冬,刘在新. 2014

[9]猪细小病毒BQ-C毒株VP2基因的鉴定及表达. 刘朝霞,刘永刚,毕可东,周顺,崔尚金. 2013

[10]猪细小病毒病毒样颗粒的体外组装. 宋品,孙世琪,董虎,滕志东,曹随忠,郭慧琛,余树民. 2017

[11]禽腺病毒4型Fiber2蛋白表达、纯化及多克隆抗体的制备. 郭浩然,贾艳娥,吉艳红,李郁. 2019

[12]禽流感病毒NS2蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备. 陈佳宁,郭晶,李旭勇,陈化兰. 2012

[13]鸡干扰素调节因子7的原核表达及多克隆抗体的制备. 崔鹏飞,邓国华,韦良孟,焦培荣,廖明. 2013

[14]鸭抗原相关转运体TAP1和TAP2原核表达及多克隆抗体的制备. 张晓娜,吴少莲,文辉强,廉传江,陈洪岩,韩凌霞. 2015

[15]鸡传染性喉气管炎病毒gG蛋白多克隆抗体的制备及初步应用. 孙永珍,赵妍,孔聪聪,崔红玉,王云峰. 2014

[16]甲型鸭肝炎病毒2A蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备. 胡文,孟春春,李传峰,陈宗艳,梁瑞英,李宁,黄云秀,吴润,刘光清. 2014

[17]Asial型口蹄疫病毒分离株P1基因的原核表达及其多克隆抗体的制备. 张中旺,张永光,王永录,潘丽,张昱. 2009

[18]结核分枝杆菌rv3036c基因的原核表达及其多克隆抗体的制备. 曹俊,陈利苹,刘银冰,鄢秋龙,刘思国. 2013

[19]鸡白细胞介素15基因在大肠杆菌中的高效表达. 独军政,陈怀涛,刘胜旺,孔宪刚. 2003

[20]高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白NSP4的原核表达及其抗体的制备. 许傲天,周艳君,李国新,于海,闫丽萍,陈宗艳,张善瑞,王礞礞,姜一峰,王亚欣,童光志. 2009

作者其他论文 更多>>