数字农科院2.0

番茄CRISPR/Cas9介导的多基因编辑技术体系构建与应用

文献类型： 中文期刊

作者： 杨孟霞;刘晓林;曹雪;魏凯;宁宇;杨沛;李珊珊;陈紫月;王孝宣;国艳梅;杜永臣;李君明;刘磊;李鑫;黄泽军

作者机构：

关键词： 番茄;CRISPR/Cas9;多基因编辑;U3 snRNA基因;同尾酶技术;GFP标记基因;果实性状相关基因

期刊名称：园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2023 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2023版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 为了构建CRISPR/Cas9介导的番茄多基因编辑体系，用SlU6-2p、SlU6-3p、SlU6-7p、SlU3-5p、SlU3-9p和SlU6-5p启动子分别替换pKSE401和pCBC-DT1T2载体中的拟南芥U6启动子，构建了1个双元载体（pMGET）、2个中间载体（pKC-S2M和pKC-S3M）和3个gRNA模块载体（pCBC-S1、pCBC-S2和pCBC-S3）。为了测试该多基因编辑体系，通过PCR扩增、Golden gate克隆和同尾酶技术，将含有6个番茄果实性状相关基因Green flesh（GF）、Ovate（O）、Locule number（LC）、SlMYB12（Y）、Tangerine（T）、Uniform ripening（U）靶点序列的sgRNA聚合构建多基因编辑载体pMGET-OYGTULC和pMGET-TULCOYG，检测6个基因同时被编辑的效率分别为44.00%和11.76%。用携带pMGET-OYGTULC载体的根癌农杆菌转化番茄材料获得2株6个基因均被编辑的植株，序列变异为单个碱基的插入、单个或多个碱基的缺失及大片段的缺失等多种形式。本研究中该多基因编辑体系可以高效地应用于番茄多基因编辑，并且可以得到稳定遗传的突变体，可为番茄基础研究和遗传改良提供一个简便的工具箱。

分类号：

  • 相关文献

[1]CRISPR/Cas9介导的多基因编辑系统在大豆中的应用. 关贝贝,王燕娟,陈海峰,陈水莲,沙爱华,曹东. 2021

[2]二倍体马铃薯StBRC1a功能缺失突变体的获得及其功能分析. 冯爽爽,罗嘉翼,朱曦鉴,蒋继滨,黄三文,张金喆. 2020

[3]病毒功能性受体的筛选新策略及其应用. 孙慧敏,李素,王文静,仇华吉. 2019

[4]基因编辑技术在人参中的应用展望. 王琪,张浩,王博文,雷秀娟,王英平. 2020

[5]水稻白叶枯病感病相关基因Xig1的分子鉴定及抗病资源创制. 郑凯丽,纪志远,郝巍,唐永超,韦叶娜,胡运高,赵开军,王春连. 2020

[6]拟南芥SWEET1/2/3基因突变体构建及功能鉴定. 辛红佳,李鹏程,滕守振,李圣彦,汪海,郎志宏. 2020

[7]CRISPR/Cas9技术及其在猪基因编辑中的应用. 刘思远,卢丹,唐中林. 2020

[8]CRISPR/Cas9基因组编辑技术及其在草类植物中的应用. 王丹,周美亮,李金博,孙占敏,吴燕民. 2017

[9]除草剂抗性农作物育种研究进展. 李燕敏,祁显涛,刘昌林,刘方,谢传晓. 2017

[10]水稻靶标基因单碱基定向替换技术的建立. 任斌,严芳,旷永洁,李娜,张大伟,林宏辉,周焕斌. 2017

[11]利用CRISPR/Cas9技术构建OAS2敲除的PK-15细胞系及敲除OAS2对CSFV复制的影响. 张越秀,张华伟,李连峰,仇华吉. 2019

[12]利用CRISPR/Cas9技术编辑粒长基因GS3改善粳稻花时. 孟帅,徐鹏,张迎信,王宏,曹立勇,程式华,沈希宏. 2018

[13]产油微藻基因组编辑技术研究进展. 郝夏晖,黄凤洪,龚阳敏. 2019

[14]利用CRISPR/Cas9技术缺失MDV分离株meq基因的研究. 张峰,于正浩,兰兴鸽,张艳萍,王永强,高立,高玉龙,李凯,祁小乐,崔红玉,潘青,王笑梅,刘长军. 2019

[15]CD163双等位基因编辑猪的制备及传代. 魏迎辉,刘志国,徐奎,Evanna Huyhn,Paul Dyce,李继良,周伟良,董树仁,冯保亮,牟玉莲,Ju LangLi,李奎. 2018

[16]CRISPR/Cas9技术编辑淀粉合成基因PUL. 奉宝兵,魏祥进,焦桂爱,胡时开,邬亚文,谢黎虹,圣忠华,邵高能,唐绍清. 2019

[17]弓形虫Tgcsp2基因敲除株的表型和毒力. 牛美容,李法财,谢世臣,聂兰碧,朱兴全,赵光辉. 2020

[18]基于CRISPR/Cas9系统在全基因组范围内筛选功能基因及调控元件研究进展. 刘思远,易国强,唐中林,陈斌. 2020

[19]弓形虫MORN2基因敲除株的构建及其表型鉴定. 陈凯,王金磊,白梦捷,杨文彬,黄思扬. 2018

[20]基于CRISPR/Cas9技术的月季TCP9基因转化拟南芥. 谢磊,王姗珊,胡博文,熊兴耀,陈己任. 2017

作者其他论文 更多>>