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来源于酸热脂环酸杆菌的嗜酸性α-淀粉酶的表达研究

文献类型： 中文期刊

作者： 袁铁铮;姚斌;罗会颖;王亚茹;伍宁丰;范云六

作者机构：

关键词： 嗜酸性α-淀粉酶;酸热脂环酸杆菌;毕赤酵母;基因表达

期刊名称：生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2005 年 21 卷 01 期

页码： 82-87

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 从嗜酸耐热的酸热脂环酸杆菌Alicyclobacillusacidocaldarius中克隆到α_淀粉酶的基因 (amy) ,该基因全长 390 3bp ,编码130 1个氨基酸 ,理论分子量约 14 0kD。将基因amy分别克隆到大肠杆菌E .coli表达载体pET_2 2b(+)和毕赤酵母P .pastoris表达载体pPIC9α ,并在大肠杆菌和毕赤酵母中得到了表达 ,表达产物具有淀粉酶的活性。对酵母中表达的酶蛋白AMY进行了纯化 ,并初步研究了它的酶学性质 ,它的作用最适pH 3 2 ,在pH 2 5～ 4 6范围内 ,酶活性保留 5 0 %以上 ,它的最适温度 6 5℃ ,在 70℃下处理 30min ,酶活性维持 5 0 %以上 ,基本保留了天然酶蛋白的耐热性和嗜酸性。位于基因amy内部 +1174～+32 88bp的基因片段amy′全长 2 115bp ,编码 70 5个氨基酸 ,在E .coli表达后依然具有淀粉酶的活性。

分类号： Q814

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