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具双价基因的甘蓝型油菜游离小孢子的遗传转化

文献类型： 中文期刊

作者： 王新发;王汉中;刘贵华;胡赞民;郑元本

作者机构：

关键词： 甘蓝型油菜;小孢子培养;几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因;根癌农杆菌介导

期刊名称：农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2004 年 12 卷 02 期

页码： 138-142

收录情况： CSCD

摘要： 以双低(低芥酶和低硫甙)甘蓝型油菜(Brassicanapus)游离小孢子为受体,通过根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens )介导,将几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因导入杂交油菜新品种油杂4号亲本恢复系和保持系中,成功地获得了转基因植株。在小孢子数与根癌农杆菌数接近时,100~200 mg/L羧苄青霉素能有效地抑制菌的生长,而不影响小孢子胚胎形成。用预培养2 d的小孢子与根癌农杆菌共培养10 h后离心,重新悬浮小孢子于含上述浓度的羧苄青霉素的NLN培养基中培养,获得了16株抗卡那霉素的恢复系的单倍体植株。经PCR及PCR-Southern blot检测,有10株呈阳性,证明外源基因已整合到油菜基因组中。

分类号： S565.4

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