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日本血吸虫PHB1的克隆、表达及其免疫保护效果评估

文献类型： 中文期刊

作者： 张旻;杨珊珊;张燕;周思含;黄明月;洪炀;林矫矫;傅志强

作者机构：

关键词： 日本血吸虫;抗增殖蛋白1;克隆;表达;免疫保护效果

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2022 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; 科技核心（2021版） ; 农林核心（2020版）

摘要： 为了探讨日本血吸虫抗增殖蛋白1（SjPHB1）的免疫保护潜力，应用PCR技术扩增SjPHB1基因，克隆至pMD19-T克隆载体，对其进行测序及生物信息学分析；构建pET32a（+）-SjPHB1重组表达质粒，转化至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，对重组菌进行鉴定、诱导表达，并纯化重组蛋白；利用Western blot检测重组蛋白的反应原性；以小鼠为动物模型，评估重组蛋白抗日本血吸虫病的免疫保护效果。结果显示：SjPHB1基因ORF序列为825 bp，编码274个氨基酸，具有2个优势辅助T细胞抗原表位和6个优势B细胞抗原表位；rSjPHB1以包涵体的形式表达，分子量约为47 kDa，能被anti-His的小鼠血清、人工感染日本血吸虫的小鼠阳性血清特异性识别，获得正确表达；该重组蛋白能被免疫小鼠血清识别，具有良好的反应原性；rSjPHB1刺激小鼠产生了较高水平的特异性IgG抗体，但未诱导产生显著的减虫率和肝脏减卵率。本研究结果为进一步探讨SjPHB1基因的生物学特性提供了基础。

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