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H9N2亚型禽流感病毒NP蛋白纳米抗体的筛选与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 梁世蕊;吉艳红;王丹;朱启运

作者机构：

关键词： 禽流感病毒;H9N2亚型;核蛋白;纳米抗体;特性鉴定

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2023 年

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2023版） ; ; 农林核心（2020版）

摘要： 以H9N2亚型禽流感病毒（avian influenza virus， AIV）为研究对象，将病毒灭活纯化后免疫羊驼，测得其血清抗体效价为1∶128 000；提取羊驼外周血淋巴细胞RNA，获得单个重链可变区（variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody， VHH）基因，成功构建H9N2亚型AIV的纳米抗体噬菌体展示文库，文库库容量为1.3×109 cfu/mL，阳性率为100%；以H9N2亚型AIV-NP蛋白为靶向抗原，利用噬菌体展示技术进行筛选，获得3株靶向H9N2亚型AIV-NP蛋白的纳米抗体；构建纳米抗体真核表达重组质粒，表达纯化后收获3株纳米抗体；通过间接ELISA、Western-blot、间接免疫荧光试验对纳米抗体的亲和力、特异性等生物活性进行鉴定，最终得到1株广谱性高亲和力的H9N2亚型AIV-NP蛋白纳米抗体，可为检测方法的建立提供新的生物材料。

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