抗水稻黑条矮缩病毒三价RNAi表达载体的构建及转基因水稻的培育
文献类型: 中文期刊
作者: 林艳虹;瞿绍洪;杨秀芬;曾洪梅
作者机构:
关键词: RBSDV;RNA干扰;转基因水稻;Gateway技术
期刊名称:分子植物育种
ISSN: 1672-416X
年卷期: 2014 年 12 卷 05 期
页码: 19-24
收录情况: 北大核心
摘要: 水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,RBSDV)不同双链RNA片段的三价RNAi(RNA interference)表达载体在转基因水稻中的研究尚未见报道。本研究以RBSDV已报道不同双链RNA序列为基础,设计了针对S2、S6、S10三个基因共605 bp的RNAi靶序列,通过基因合成的方法获得相应的目的片段。利用Gateway~ LR Clonase~TM Ⅱ Enzyme Mix的LR反应将目的基因构建到RNAi载体pBDL03中,然后通过农杆菌转化法转到水稻品种泰粳394中。通过PCR和荧光验证共获得45株阳性苗。T1代植株RBSDV抗性鉴定结果证实针对S2、S6和S10基因的三价RNA沉默载体对RBSDV具有良好的抗性。本研究结果为利用RNAi技术进行植物抗病毒研究奠定了基础。
分类号: S435.111.4
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