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马铃薯Stpatatin 05基因转录调控因子筛选及互作验证

文献类型： 中文期刊

作者： 俞婷;黄丹丹;朱炎辉;杨梅宏;高冬丽

作者机构：

关键词： 马铃薯;patatin蛋白;酵母单杂交;Stpatatin 05;StMYB86-like;转录调控

期刊名称：生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： EI（2025版） ; ; 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 【目的】筛选对patatin启动子有调控作用的转录因子，为patatin蛋白积累提供新的基因资源。【方法】选取Stpatatin 05作为候选基因，克隆其启动子序列，构建pAbAi-Stpatatin 05pro诱饵载体，将其转化至酵母细胞中，获得诱饵酵母菌株。利用马铃薯幼嫩块茎组织的c DNA文库进行酵母单杂交筛库实验，对候选蛋白进行互作验证和互作位点分析，并利用双荧光素酶报告实验分析其对下游靶标基因表达的影响。【结果】经酵母单杂交筛选获得一个候选蛋白StMYB86-like。StMYB86-like属于MYB类转录因子家族，该蛋白编码320个氨基酸，定位在细胞核。克隆StMYB86-like基因全长序列，进行酵母单杂交验证，结果显示在30 mmol/L 3-氨基-1,2,4-三氮唑的条件下，对照组酵母不能正常生长，而实验组酵母能正常生长，表明转录因子与基因启动子存在互作。酵母单杂交结果表明StMYB86-like转录因子能够结合启动子中的CAACTG结构域，双荧光素酶报告实验证明StMYB86-like负调控下游靶标基因的表达。【结论】StMYB86-like与Stpatatin ...

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