文献类型： 中文期刊
作者： 魏娟文;朱红;张贝贝;张耀东;王瑶;姚澜;AFAYIBO Dossêh Jean Ap?tre;祁晶晶;田明星;丁铲;王桂军;于圣青;王少辉
作者机构：
关键词： 大肠杆菌;血清型;多重PCR;检测
期刊名称：中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2022 年
页码：
收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2021-2022年度） ; 科技核心（2021版） ; 农林核心（2020版）
摘要： 为了建立一种可以同时鉴定大肠杆菌O8、O9、O149与O157血清型的快速高效多重PCR检测方法，本研究根据GenBank中大肠杆菌O8、O9、O149、O157血清型的O抗原合成基因簇特异性靶标基因序列，设计合成4对PCR引物，优化引物浓度及反应条件，建立多重PCR检测方法。然后，分析多重PCR方法的特异性、敏感性，并利用建立的多重PCR方法检测大肠杆菌临床分离株验证该方法的可靠性。特异性结果显示，多重PCR方法可有效鉴定大肠杆菌O8、O9、O149、O157血清型，而检测其他血清型大肠杆菌及菌种时无扩增条带，表明多重PCR方法具有较好的特异性。敏感性结果显示，多重PCR方法检测大肠杆菌O8、O9、O149、O157血清型的菌液和DNA的最低检测限分别为105 CFU、105 CFU、103 CFU、103 CFU和1 ng、100 pg、10 pg、10 pg。临床分离株检测显示，与传统血清凝集试验相比，多重PCR方法更准确、可靠。本研究成功建立了一种可特异、灵敏、快速鉴定大肠杆菌O8、O9、O149与O157血清型的多重PCR方法，为大肠杆菌O8、O9、O149与O157血清型检测和流行病学调查提供了新的技术手段。
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