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玉米Opaque-2基因在毕赤酵母中的表达

文献类型： 中文期刊

作者： 周志强;宋丽雅;颜娜;张世煌;李新海

作者机构：

关键词： 玉米;Opaque-2;毕赤酵母;蛋白表达

期刊名称：玉米科学

ISSN： 1005-0906

年卷期： 2014 年 05 期

页码： 6-12+19

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 从玉米自交系辽2345授粉后18 d的胚乳中提取总RNA,经反转录后得到第一链c DNA,利用Opaque-2基因的特异引物克隆出该基因的全编码区,将该编码区的全序列以正确的阅读框架利用Infusion同源重组的方法亚克隆到毕赤酵母表达载体p PIC9的α因子下游,并置于AOXⅠ启动子控制下,利用p PIC9表达载体上的特异引物进行PCR鉴定,鉴定后的重组质粒用Bgl II酶切线性化后,电转化导入甲醇型毕赤酵母菌株GS115中,利用MM、MD和菌落PCR的方法筛选出Mut+表型,得到的重组子以甲醇诱导表达蛋白。经SDS-PAGE结果显示,Opaque-2蛋白得到表达,其相对分子质量(Mr)约为47 KD。

分类号： S513

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