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牛病毒性腹泻病毒两种基因型双重RT-PCR检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 王勤;何博;欧云文;刘俐君;杨磊;潘琴;张杰

作者机构：

关键词： 牛病毒性腹泻病毒1型; 牛病毒性腹泻病毒2型; 双重反转录-聚合酶链反应

期刊名称：动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2021 年 42.0 卷 9.0 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： 为建立牛病毒性腹泻病毒（BVDV）双重RT-PCR检测方法,根据BVDV-1（AF091605.1、KF501393.1、MK204904.1、MN513404.1和MG923683.1）和BVDV-2（AF502399.1、MG436782.1、 AF145969.1、KC176777.1和MN513411.1）流行毒株5′-UTR保守序列设计2对特异性引物,通过优化反应条件,建立可同时检测BVDV-1和BVDV-2的双重RT-PCR方法。结果显示,该检测方法重复性好、特异性强,可分别检测出BVDV-1和BVDV-2核酸,与牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）、牛轮状病毒（BRV）、牛冠状病毒（BCV）、牛副流感病毒3型（BPIV-3）、猪瘟病毒（CSFV）均不发生交叉反应;最低检测量为1×103拷贝/μL和1×102拷贝/μL;对达州及周边地区的332份临床样品进行检测,结果表明,该地区BVDV-1阳性率为7.83%,BVDV-2阳性率为0.90%,未检出BVDV-1和BVDV-2混合感染的临床样品。综上所述,建立的双重RT-PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性、重复性和临床适用性,可用于BVDV的临床诊断和分子流行病学调查。

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