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一种高温酸性α-淀粉酶基因的高效表达和表达产物分析

文献类型： 中文期刊

作者： 袁铁铮;姚斌;罗会颖;王亚茹;柏映国;伍宁丰;范云六

作者机构：

关键词： 高温酸性α-淀粉酶;巴斯德毕赤酵母;基因表达;多组分表达产物

期刊名称：高技术通讯

ISSN： 1002-0470

年卷期： 2005 年 15 卷 011 期

页码： 63-68

收录情况： EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 一种高温酸性α-淀粉酶基因经密码子优化后在巴斯德毕赤酵母中得到了高效表达,表达的重组α-淀粉酶RBD5063具有α-淀粉酶的活性,表达量达到60MG/L.对RBD5063进行了纯化并对多组分的表达产物进行了研究.RBD5063作用最适PH值为5.0,在PH3.5~10.0范围内酶活性保留50%以上,最适温度在105~110℃之间,在90℃下酶活性半衰期约30MIN.低浓度CA2+对激活RBD5063活性和维持稳定性是必需的,高浓度对活性会产生轻微抑制作用,MG2+、SDS和TRITION X-100都能够部分抑制RBD5063活性,CU2+和EDTA严重抑制RBD5063活性.表达产物水解可溶性淀粉主要产物是单糖和低聚寡糖.表达产物包括分子量分别是62、56、44KD的3种活性组分,在通常情况下主要以大分子量活性多聚体的形式存在.重组α-淀粉酶RBD5063不存在N-连接的糖基化,但是存在O-连接的糖基化现象,O-连接对RBD5063的热稳定性和最适温度没有显著影响.

分类号： Q5

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