农杆菌介导大豆子叶节遗传转化体系的优化研究
文献类型: 中文期刊
作者: 姬月梅;陈受宜;李英慧;张丽娟;宋晓华;常汝镇;邱丽娟
作者机构:
关键词: 大豆;遗传转化;子叶节;Na+/H+逆向转运蛋白;再生
期刊名称:大豆科学
ISSN: 1000-9841
年卷期: 2008 年 27 卷 01 期
页码: 26-32
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 以大豆品种"中豆32、Peking、早熟18、绥农14"子叶节为受体材料,用农杆菌介导法转入与抗逆相关的小麦Na+/H+逆向转运蛋白基因(TaNHX2),探索外植体大小、培养基主要成分、培养时间等因素对外植体分化的影响,旨在优化遗传转化条件,提高大豆转基因的遗传转化效率。研究结果表明,以健康外植体获得率、抗性丛生芽获得率和抗性芽伸长比率为指标,筛选并建立的优化转化系统为:大豆萌发和不定芽诱导时分别加入0.5mgL-16-BA和1.0mgL-16-BA,浸染时间为30min、共培养时间为3d;外植体大小为2/3子叶,kan抗性筛选浓度第一阶段和第二阶段分别是60和50mgL-1;利用上述方法,已获得中豆32转基因再生植株,经PCR分子检测,证明目的基因TaNHX2已导入并整合到大豆基因组中,转化率为3.78%。
分类号: S565.1
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