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水稻OsUAP2基因生物信息学分析及原核表达活性鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 肖桂青;陈雅婷;周嘉豪;文媛;高敏;张海文;卢向阳

作者机构：

关键词： 水稻;OsUAP2;原核表达蛋白;酶活测定

期刊名称：分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2022 年 20 卷 1 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; 科技核心（2021版） ; 农林核心（2020版）

摘要： UAGPase广泛存在于生物体,是糖代谢过程中一类重要酶。我们前期发现水稻Os UAP1具有单向催化UDPG分解代谢活性,Os UAP2与Os UAP1序列相似性极高。本研究对Os UAP2进行生物信息学分析,构建并表达重组蛋白,并鉴定其酶蛋白活性。结果表明,OsUAP2基因位于4号染色体,编码区序列长1482 bp,编码493个氨基酸；Os UAP2具有UDPGP保守结构域,无跨膜区域,N-端不含信号肽；二级结构分析显示,该蛋白含α-螺旋和无规则卷曲较多；同源性分析表明,Os UAP2与玉米UAGPase的亲缘关系最近。在16℃下经0.1 mmol/L IPTG诱导8 h,原核菌株BL21表达出分子量约55 kD可溶性重组蛋白。体外酶活性测定表明,Os UAP2能同时催化UDPG降解和合成,表现出双向可逆催化的特点。本研究结果为进一步深入研究OsUAP2基因的生物学功能提供了科学依据。

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