A型塞内卡病毒的分离鉴定及抗3A蛋白多克隆抗体的制备
文献类型: 中文期刊
作者: 韩松;段宏勇;杨楠;王树茂;高飞;赵款;周艳君;童武;姜一峰;童光志;李丽薇
作者机构:
关键词: A型塞内卡病毒;遗传进化分析;3A蛋白;多克隆抗体
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2025 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2025-2026年度) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)
摘要: A型塞内卡病毒(senecavirus A,SVA)作为一种可以引起猪水泡样症状的外来病原,与口蹄疫病毒引起的临床症状难以区分。本研究成功分离1株SVA,将其命名为HN2019。经全基因组测序和进化分析发现,该分离株与我国毒株CH-HN-2017亲缘性最高。该毒株可在猪肾传代细胞(PK-15)、乳仓鼠肾细胞(BHK-21)中有效复制增殖,感染后均能产生细胞病变。通过病毒一步生长曲线、间接免疫荧光、Western-blot等试验研究了该毒株的生物学特性。同时,利用pCold-TF质粒构建该毒株非结构蛋白3A的原核表达载体,转化大肠杆菌系统,发现该重组蛋白可在上清中可溶性表达。将纯化后的重组蛋白分4次免疫BALB/c小鼠,成功制备针对3A蛋白的多克隆抗体。该抗体效价为1∶128 000,可特异性识别病毒感染的细胞产生特异性荧光,证明该抗体具有良好的反应性和特异性,为进一步研究SVA 3A蛋白的生物学功能及病毒的致病机制提供有效工具。
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