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肉鸡胫骨成骨细胞分离培养方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 冯心语;张卫云;赵静怡;张丽阳;田冰;胡云;崔小燕;汪圣晨;侯禛;罗绪刚;李婷婷

作者机构：

关键词： 鸡;胫骨成骨细胞;组织块法;分离与培养

期刊名称：中国家禽

ISSN： 1004-6364

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 为探寻一种操作简单、经济实用，且能获得纯度高、活性强的肉鸡长骨成骨细胞（Osteoblast,OB）体外培养方，试验将1日龄AA肉鸡胫骨皮质骨剪碎（1～3 mm2）后，移入60 mm细胞培养皿中，加入15%FBS的DMEM完全培养液，于37℃培养7 d后，进行传代。倒置显微镜观察成骨细胞形态；CCK-8法检测成骨细胞增殖活性；碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase,ALP）、Ⅰ型胶原免疫荧光及茜素红S（Alizarin red s,ARS）染色鉴定成骨细胞体外生物学特性；实时定量PCR法检测成骨细胞标志基因ALP、Runt相关转录因子（Runt-related transcription factor 2,Runx2）、成骨细胞特异性转录因子（Osterix,OSX）及Ⅰ型胶原蛋白α1链（Collagen type 1 alpha 1chain,COL1A1）表达。结果显示：分离获得的细胞具有典型成骨细胞形态特征，增殖活性强，纯度高（97.4%），大量分泌ALP和Ⅰ型胶原，高表达ALP、Runx2、OSX和COL1A1，且茜素红S染色呈阳性。研究表明组织块法获得的成骨细胞纯度高、活性好，且成骨能力强。

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