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类NADC30-like株和HP-PRRSV鉴别诊断RT-PCR方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

作者： 乔璐;柳海云;杨健;黄国梁;郭慧琛;孙世琪;牛家强

作者机构：

关键词： HP-PRRSV;NADC30-like;鉴别诊断;RT-PCR;分离纯化

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2025 年

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2025-2026年度） ; ; 科技核心（2024版） ; ; 农林核心（2024版）

摘要： 本研究旨在建立一种猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）类NADC30株（NADC30-like）和高致病PRRSV（HP-PRRSV）鉴别诊断的RT-PCR方法，为该病的检测和防控提供依据。根据PRRSV Nsp2基因核苷酸序列特征，设计一种可同时鉴定HP-PRRSV和NADC30-like株的RT-PCR方法。结果显示，该方法扩增HP-PRRSV和NADC30-like株Nsp2基因片段大小分别为931 bp和628 bp，最低检测下限分别为472 copies/μL和132 copies/μL，对其他基因亚型PRRSV和病毒均未扩增出特异性条带，针对此方法，分离优势毒株并纯化。对来自甘肃省部分地区猪场的196份临床样品进行检测，发现28份样品为HP-PRRSV核酸阳性，15份样品为NADC30-like核酸阳性，3份样品为HP-PRRSV+NADC30-like核酸阳性；RT-PCR检测ORF5基因，发现HP-PRRSV和NADC30-like核酸阳性样品数量分别为37份和9份，但未发现混合感染样品；分离优势毒株，得到了传代稳定的病毒；纯化后获得了纯度较高且结构完整的病毒粒子。本研究建立的RT-PCR方法可用于HP-PRRSV和NADC30-like株快速鉴别诊断和分子流行病学调查研究，但其灵敏度稍差；且其无法检测其他PRRSV亚型毒株。

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