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应用~(32)P标记物检测glnA表达载体及转基因水稻愈伤组织中NPTⅡ酶活性(英文)

文献类型： 中文期刊

作者： 苏金;张雪琴;颜秋生;陈章良;尤崇杓

作者机构：

关键词： 表达载体;NPT;glnA;愈伤组织;电激法;BamHI;片段克隆;筛选阳性克隆;转基因水稻;启动子

期刊名称：中国核科技报告

ISSN：

年卷期： 1993 年 00 期

页码： 16

收录情况： CSCD

摘要： 应用PCR技术扩增了编码巴西固氮螺菌AzospirillumbrasilenseSP7谷酰胺合成酶(GS)的基因glnA,扩增的1.4kbDNA片段克隆于Bluescript-SK载体的EcoRV位点。序列测定结合限制性内切酶图谱分析,证实了携有BamHI位点的1.4kbDNA片段确为巴西固氮螺菌SP7的glnA基因。该基因与pCo24的Bg1Ⅱ位点连接转化,筛选出以CaMV35S为启动子的glnA表达载体pGSC35。利用α-~(32)P-dATP标记探针进行菌落原位杂交筛选阳性克隆,经三次连接转化后,又构建了另一个带水稻肌动蛋白1启动子的glnA表达载体pAGNB92。由水稻T98...

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