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一种来源于Bispora betulina的酸性木聚糖酶基因克隆及其酶学性质研究

文献类型: 中文期刊

作者: 魁红;罗会颖;董守良;姚斌

作者机构:

关键词: Bispora betulina;酸性木聚糖酶;毕赤酵母;酶活与稳定性

期刊名称:中国农业科技导报

ISSN: 1008-0864

年卷期: 2010 年 12 卷 05 期

页码: 109-115

摘要: 利用简并PCR和TAIL-PCR技术从嗜酸性真菌Bispora betulina中克隆得到一个酸性木聚糖酶基因xyn11BB。该基因全长1 207 bp,含有三段内含子、一段外显子和一个终止密码子,编码由297个氨基酸组成的蛋白质,推测蛋白质含有一个CBM1结构域。将不带原基因信号肽编码序列的cDNA基因以正确阅读框架克隆到表达载体pPIC9上,并在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中诱导表达,其表达活性达121.15 U/mL。重组蛋白经硫酸铵分级沉淀和阴离子交换柱纯化后达到电泳纯。对其酶学性质分析表明,重组木聚糖酶最适温度为50℃,最适pH为4.5,在酸性条件下具有良好的活性和稳定性,可作为饲料用酶的备选。

分类号: Q78

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