针对猪瘟病毒Erns基因实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用
文献类型: 中文期刊
作者: 王树茂;王桂花;王安冉;周艳君;姜一峰;乔思娜;赵款;童光志;李丽薇;高飞
作者机构:
关键词: 猪瘟病毒;Erns基因;荧光定量PCR
期刊名称:中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2023 年
页码:
收录情况: 北大核心(2020版) ; ; CSCD(2023-2024年度) ; ; 科技核心(2023版) ; ; 农林核心(2020版)
摘要: 为建立针对猪瘟病毒(CSFV)的快速诊断方法,根据猪瘟病毒石门强毒株(GenBank ID: AF092448.2)已公布的Erns基因序列设计并合成特异性引物及探针,建立针对Erns基因的TaqMan荧光定量PCR检测方法,验证其特异性、敏感性、重复性,并进行临床样品及重组病毒的检测。结果显示,建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法的Ct值与标准品在1×109~1×102 copies/μL范围内具有很好的线性关系,相关系数为0.99,斜率为-3.661 5,检测下限为1.0×101 copies/μL,与其他能引起相似临床症状的猪源病毒无交叉反应。重复性试验结果显示,组间与组内变异系数均小于2.925 02%,证实该方法重复性好。本方法适用于临床样品中CSFV抗原核酸的检测,同时也可以用于CSFV在细胞上增殖情况的检测和本实验室构建的表达CSFV Erns基因的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒的鉴定及检测,对于临床上CSFV抗原检测、CSF诊断及CSFV的实验室研究有重要意义。
分类号:
- 相关文献
[1]针对猪瘟病毒E2蛋白的实时荧光定量PCR方法的建立及应用. 高飞,姜一峰,李国新,张玉娇,李丽薇,虞凌雪,周艳君,郑海红,童光志. 2018
[2]表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组猪瘟兔化弱毒疫苗株的构建与鉴定. 张玲楷,李永锋,谢利豹,孙元,王晓,仇华吉. 2018
[3]利用CRISPR/Cas9技术构建OAS2敲除的PK-15细胞系及敲除OAS2对CSFV复制的影响. 张越秀,张华伟,李连峰,仇华吉. 2019
[4]E2蛋白介导猪瘟病毒的细胞吸附与内化. 尹彩霞,于少雄,宋琨,李素,杨玉莹,仇华吉. 2018
[5]猪肺泡巨噬细胞极化对猪瘟病毒复制的影响. 高素丽,胡守萍,张交儿,张卓,刘强,何希君. 2018
[6]中国猪瘟净化之路:离我们还有多远?. 孙元,仇华吉. 2018
[7]表达增强型绿色荧光蛋白的报告猪瘟病毒C株的构建及在家兔中生物学特性评价. 韩玉莹,谢利豹,李永锋,仇华吉. 2020
[8]猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区高效表达及间接ELISA抗体检测方法的建立和应用. 陈九,潘丽,马中元,崔燕. 2020
[9]猪瘟石门系强毒株SYBR Green-I染料法实时荧光定量PCR方法的建立. 王伟,邹月红,李雪松,陈欣,郎越坤,田华斌,符芳,李曦,李集临. 2011
[10]猪瘟病毒E2蛋白主要抗原区编码基因的原核表达及抗原性研究. 刘萍,王宏博,祁光宇,刘学荣,牟克斌. 2013
[11]表达猪瘟病毒E2蛋白的三种重组腺病毒在兔体上的免疫效力比较. 孙元,李宏宇,张兴娟,李伟杰,梁冰冰,李娜,仇华吉. 2010
[12]猪瘟重组蛋白E2的兔体免疫保护试验. 田宏,吴锦艳,尹双辉,尚佑军,郑海学,刘湘涛. 2009
[13]猪瘟E~(rns)基因在大肠杆菌中的高效表达. 贾洪林,仇华吉,李娜,朱庆虎,罗玉子,童光志. 2005
[14]共表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白和猪瘟病毒E2蛋白的“自杀性”DNA疫苗在小鼠体内诱导的免疫应答. 孙建富,赵和平,李娜,孙元,夏照和,周艳君,王煜,祁巧芬,鲁承,仇华吉. 2008
[15]猪瘟病毒E2蛋白抗原单表位基因的融合表达及其免疫活性的研究. 刘思国,涂长春,余兴龙,张茂林,刘伯华,吴健敏. 2005
[16]免疫压力下猪瘟病毒遗传稳定性研究. 朱妍,史子学,涂长春. 2013
[17]表达猪瘟病毒E2蛋白的重组腺病毒的构建及其在兔体内的免疫原性分析. 孙元,祁巧芬,梁冰冰,成丹,李娜,于墨洋,王宇飞,刘霓虹,朱庆虎,仇华吉. 2008
[18]猪瘟流行野毒E~(rns)基因的序列分析. 刘湘涛,韩雪清,刘伯华,赵启祖,李明晖,马军武,李建强,谢庆阁. 2000
[19]五种重要猪病病毒基因芯片探针的建立及其应用. 符芳,杨玉菊,陈微晶,张永欣,蔡雪辉. 2010
[20]我国近期猪瘟分子流行病学动态. 孙世琪,靳野,郭慧琛,尚佑军,魏旭文,马军武,韩雪清,邱伯根,梁原祥,刘湘涛,谢庆阁. 2004
作者其他论文 更多>>
-
非洲猪瘟病毒p30蛋白表达与单克隆抗体制备
作者:孟鑫;李松楠;王安铖;闫婉婉;李俊波;陈玲超;童武;孔宁;单同领;于海;童光志;邢明伟;郑浩
关键词:非洲猪瘟;p30蛋白;单克隆抗体;原核表达;真核表达
-
猪繁殖与呼吸综合征病毒类NADC34毒株的研究进展
作者:李佳乐;周艳君;刘佳晨;郭子强;乔思娜;赵冉;郑海红;唐银保;王树茂;王安冉;李丽薇;高飞
关键词:类NADC34 PRRSV;致病性;重组
-
宿主天然免疫因子在猪繁殖与呼吸综合征病毒感染中的作用机制研究进展
作者:郭子强;刘佳晨;周艳君;赵冉;郑海红;童光志;李丽薇;高飞
关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒;天然免疫因子;结构蛋白;非结构蛋白;干扰素;microRNA
-
旱作农田覆膜和秸秆碳投入对土壤团聚特性及作物产量的影响
作者:王钰皓;庞津雯;卫婷;高飞;刘恩科;贾志宽;张鹏
关键词:双垄沟覆膜;土壤团聚特性;有机碳;玉米产量;秸秆碳投入
-
表达非洲猪瘟病毒p72蛋白的重组杆状病毒构建与鉴定
作者:王安铖;李俊波;胡一帆;孟鑫;陈玲超;童武;单同领;于海;孔宁;刘雪兰;童光志;徐家萍;郑浩
关键词:非洲猪瘟病毒;杆状病毒表达;p72蛋白;抗原性
-
我国大规模高生物安全风险车间防烟排烟设计关键点探讨
作者:崔磊;王燕芹;祁建城;姜一峰;赵刚;宋国亮;李晓斌;牛维乐;刘文利;梁磊
关键词:大规模;高生物安全风险车间;消防;防烟排烟设计;规范
-
非洲猪瘟病毒p17蛋白的哺乳动物细胞表达及鉴定
作者:乔思娜;赵款;刘佳晨;李国新;童武;周艳君;赵冉;童光志;高飞;李丽薇
关键词:非洲猪瘟病毒;p17蛋白;293i细胞;多克隆抗体