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中国株EIAV S2基因逆向突变感染性克隆的构建及体外感染性评价

文献类型： 中文期刊

作者： 高旭;姜成刚;韩秀娥;赵立平;沈荣显;相文华;周建华

作者机构：

关键词： 马传染性贫血病毒;S2基因;逆向突变;感染性克隆

期刊名称：病毒学报

ISSN： 1000-8721

年卷期： 2009 年 25 卷 04 期

页码： 309-315

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以中国株EIAV的驴强毒株EIAVDV115与疫苗株EIAVFDDV15的S2基因变化规律为依据,利用反向遗传技术对EIAV弱毒疫苗株全基因组感染性克隆pFDDV3-8的S2基因区进行逆向突变,构建了含有强毒株EIAVDV115S2基因区内4个稳定点突变的克隆质粒pFDDVS2r1-3-4-5,将该质粒转染FDD后进行体外继代盲传,经RT-PCR、逆转录酶活性、间接免疫荧光等检测后,显示经EIAV克隆质粒pFDDVS2r1-3-4-5转染的FDD盲传3代后,可在转染的FDD细胞培养物的上清液中检测到EIAV逆转录酶活性;该细胞培养物经RT-PCR和间接免疫荧光检测均呈EIAV阳性;在电镜下可观察到典型EIAV粒子。证明已成功拯救经EIAVS2基因逆向突变后的衍生病毒vpFDDVS2r1-3-4-5。比较vpFDDVS2r1-3-4-5衍生病毒与亲本克隆衍生病毒的复制动力学,表明前者的复制比后者略滞后。以上结果提示,对疫苗株S2基因的突变未明显影响EIAV的体外复制。

分类号： S852.659.5

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