塔宾曲霉的鉴定及基因编辑方法对其同源重组效率的影响
文献类型: 中文期刊
作者: 梁丽存;于会民;管晓晨;黄火清;姚斌;杨浩萌
作者机构:
关键词: 塔宾曲霉;菌种鉴定;基因编辑;同源重组
期刊名称:中国农业科技导报
ISSN: 1008-0864
年卷期: 2025 年
页码:
收录情况: 北大核心(2023版) ; ; CSCD(2025-2026年度) ; ; 科技核心(2024版) ; ; 农林核心(2024版)
摘要: 塔宾曲霉是一种丝状真菌,在饲料、食品、生物防治、环境修复等领域都有广泛的应用前景。通过形态学观察结合分子检测和Ehrlich试剂染色法,成功地鉴定了1株塔宾曲霉,将其命名为F316。为探索适合F316的基因编辑方法,便于基因工程改造,应用CRISPR/Cas9系统,在F316的孢子色素合成相关基因fwnA的内部插入潮霉素抗性基因,通过孢子颜色统计和抗性基因PCR验证,比较不同基因编辑元件的递送方式对同源重组效率的影响。结果表明,在F316菌株中,表达盒法、自主复制质粒法和核糖核蛋白复合体法3种不同递送方式的同源重组效率分别为70.14%、66.67%和25.70%;另外,供体DNA中同源臂的长度对同源重组效率也有影响,当同源臂长度为2 000 bp时,同源重组效率最好。
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