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苹果属植物树皮组织总蛋白提取及分离方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 张彩霞;田义;张利义;肖龙;丛佩华

作者机构：

关键词： 苹果;树皮;总蛋白;提取;双向电泳

期刊名称：植物学报

ISSN： 1674-3466

年卷期： 2015 年 50 卷 06 期

页码： 739-745

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了建立适于苹果属植物树皮组织总蛋白提取的技术方法,以8年生华月苹果(Malus domestica)树枝条为试材,通过比较不同提取方法(TCA-丙酮沉淀法(A)、甲醇/醋酸铵沉淀法(B)和改良的Tris-酚抽提方法(C))并优化提取条件,确立了最适提取及分离方法为改良的Tris-酚抽提方法。在2-DE分离时,该方法所获得的样品图谱中蛋白点总数为993个,明显多于TCA-丙酮沉淀(418个)和甲醇醋酸铵沉淀(674个)方法,并且与其它两种方法相比,该方法获得的图谱背景更清晰,蛋白点聚焦效果更好。此外,经过3个梯度上样量的图谱分离效果比较,确定了800μg为本研究中2-DE分析的理想上样量。另外,为了验证该提取及分离方法的可行性,进一步对蛋白质表达谱中的部分蛋白点进行了质谱分析,且这些蛋白点均得到了成功鉴定。该研究通过优化总蛋白提取方法及样品上样量等条件,获得了理想的双向电泳分离图谱,为苹果属植物树皮组织材料的蛋白质组学研究奠定了基础。

分类号： S661.1

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