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泛素基因介导下的猪繁殖与呼吸综合征病毒M基因对小鼠的免疫试验

文献类型： 中文期刊

作者： 张维军;童铁钢;白宇;王群;徐树兰;孙庆歌;田野;杨涛;童光志;吴东来

作者机构：

关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;M基因;泛素;体液免疫;细胞免疫;DNA疫苗

期刊名称：微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2009 年 49 卷 6 期

页码： 799-806

收录情况： CSCD

摘要： [目的]获得猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory syndrome virus,PRRSV)M 蛋白基因及其与泛素(Ubiquitin,Uh)基因融合的真核表达质粒,并进一步研究Ub对M基因免疫效果的影响.[方法]利用RT-PCR技术以PRRSV CH-1a株和BALB/c小鼠脾脏组织总RNA为模板,分别扩增出PRRSV M蛋白基因与小鼠的Ub基因,利用SOE技术将PRRSV M基因与小鼠Ub基因进行融合,最终构建真核表达质粒pVAX1-M与pVAX1-U-M.以两种真核表达质粒DNA肌肉免疫BALB/c小鼠后,分别检测体液免疫反应与细胞免疫反应,比较M单基因与Ub-M融合基因DNA免疫所诱生的免疫应答强度[结果]IFA试验表明,pVAX1-M与pVAX1-U-M均能BHK-21细胞内成功表达目的基因;两种重组质粒免疫小鼠后均可诱生PRRSVELISA抗体与细胞免疫反应,但是pVAX1-U-M诱导的细胞免疫反应明显高于pVAX1-M,差异显著(P<0.05);而其诱导的抗体水平明显低于DVAX1-M,二者差异也显著(P<0.05).[结论]泛素在一定程度上可以促进PRRSV M基因诱导细胞免疫反应,但对体液免疫未见到同样作用.

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