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高质量提取柑橘样品中病原总核酸方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 苏华楠;王雪峰;黄爱军;李中安;唐科志;周常勇

作者机构：

关键词： 柑橘;韧皮部杆菌;柑橘黄龙病;DNA提取;柑橘病害检测

期刊名称：园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2014 年 41 卷 11 期

页码： 2342-2352

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 针对柑橘老熟组织中富含多糖、多酚、色素和其它次生代谢产物的特点,以柑橘老叶老皮为试材,在传统CTAB提取法的基础上通过添加增效剂并优化配方,建立了一种快速、简便的提取植物老熟组织及其内部病原总核酸的CTAB-Triton提取法。新的提取液对细胞的裂解能力更强,且解决了传统CTAB溶液因低温析出而致DNA得率损失的弊端。比较了该法和微量葡聚糖柱纯化法制备模板时韧皮部杆菌的检出率,并用该法制备模板,分析了韧皮部杆菌在柚子叶片中的分布情况,及对其它几种柑橘病原菌进行PCR/RT-PCR检测。结果表明,CTAB-Triton方法能有效提取柑橘老熟叶片的DNA,所得DNA质量高,产量比商品化试剂盒大,提高了韧皮部杆菌的检出率,且可用于柑橘其他病原真菌、细菌,以及DNA或RNA病毒病害的PCR/RT-PCR检测,也可用于定量PCR检测和病原种群多态性分析。

分类号： S436.66

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