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基于重组致密颗粒蛋白11的弓形虫胶体金免疫层析检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 张艳玲;孟庆玲;乔军;任宏琪;赵春光;宁程程;季春晖;才学鹏

作者机构：

关键词： 弓形虫;原核表达;胶体金免疫层析试纸条

期刊名称：动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2021 年 42 卷 3 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： 将弓形虫致密颗粒蛋白11(GRA11)部分基因片段插入pET32a(+)载体,构建原核表达载体pET-32a(+)-GRA11,并转化至大肠埃希氏菌BL21(DE3)中进行诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot对诱导表达的重组蛋白GRA11 (rGRA11)进行反应原性鉴定。以rGRA11为检测线,兔抗犬IgG为质控线,制备胶体金免疫层析试纸条,与商品化的弓形虫抗体检测试剂盒对119份临床血清样品进行检测对比试验。成功构建了pET-32a(+)-GRA11原核表达载体,SDS-PAGE检测到的蛋白大小约36 ku。Western blot结果表明,弓形虫rGRA11蛋白可被弓形虫阳性血清所识别,具有较强的反应原性。与商品化弓形虫抗体间接血凝试剂盒相比,建立的免疫胶体金层析法敏感性为81.25%,特异性为100%,两种方法的总符合率为97.4%,为弓形虫病临床诊断方法研究奠定基础。

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