兔IFN-γ基因的克隆、遗传进化分析及其表达
文献类型: 中文期刊
作者: 孟庆玲;乔军;才学鹏;闫鸿斌;骆学农;景志忠
作者机构:
关键词: 中国白兔;IFN-γ基因;克隆;序列分析;表达
期刊名称:甘肃农业大学学报
ISSN: 1003-4315
年卷期: 2008 年 43 卷 04 期
页码: 13-17
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 运用RT-PCR技术对用ConA刺激后的中国白兔外周血淋巴细胞(PBMCr)进行扩增,将纯化后的PCR产物克隆入pMD18-T中进行序列测定,并进行遗传进化分析.结果发现:该基因全长501 bp,编码167个氨基酸,其中前20个氨基酸残基构成信号肽序列.与不同物种IFN-γ基因相比,核苷酸和推导的氨基酸序列有一定的差异.在推导的中国白兔IFN-γ氨基酸序列中,在41~43、108~110和117~119位存在3个潜在的N-联糖基化位点,同时存在3个Cys残基.转化重组质粒pETIFN-γ的大肠杆菌BL21(DE3)经IPTG诱导后,重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到相对分子量为22.6 kDa的重组蛋白.经凝胶薄层扫描,重组蛋白表达量可占菌体蛋白的19.2%.
分类号: S852.4
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