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猪流行性腹泻病毒N蛋白核仁定位信号对宿主细胞周期的影响

文献类型: 中文期刊

作者: 刘随新;石达;陈建飞;张鑫;时洪艳;刘孝珍;张莎;王璐;冯力

作者机构:

关键词: 猪流行性腹泻病毒;核衣壳蛋白;核仁定位信号;流式细胞术;宿主细胞周期

期刊名称:中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2013 年 35 卷 03 期

页码: 173-176

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为研究猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳蛋白(N)与宿主细胞相互作用,本研究根据前期已经鉴定的PEDV N蛋白核仁定位信号序列,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法扩增出核仁定位信号序列缺失的PEDV N基因(dN),并将其与真核表达载体pAc-GFP-C1连接,构建重组质粒pAc-GFP-dN。将pAc-GFP-dN转染于Vero E6细胞中,利用激光共聚焦显微镜分析重组质粒pAc-GFP-dN表达蛋白的定位情况,并利用流式细胞仪检测转染细胞的周期变化。实验结果表明:与完整的N蛋白相比,缺失核仁定位信号的N蛋白不能定位于细胞核仁,同时丧失了使宿主细胞周期在G2/M期停滞的能力,从而揭示了N蛋白核仁定位信号对宿主细胞具有重要的影响。

分类号: S852.65

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