数字农科院2.0

乙型脑炎病毒NS1'蛋白移码序列的鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 郑浩;童光志

作者机构：

关键词： 乙型脑炎病毒;核糖体移码;NS1'蛋白

期刊名称：中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2012 年 20 卷 01 期

页码： 38-42

摘要： 本文通过对猪乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)基因组中移码序列分析,设计合成三条引物,通过PCR扩增出假定的NS1'移码片段,并将移码片段三倍重复克隆入pET-28a表达载体中。重组质粒转化E.coli BL-21后,经IPTG诱导在37℃下实现目的片段的可溶性表达。纯化表达产物,并免疫小鼠制备了多抗血清,以多抗血清为一抗,对JEV感染的Vero细胞进行免疫荧光分析,结果发现抗移码片段表达蛋白的血清可识别JEV蛋白。以JEV感染Vero细胞,提取感染细胞总蛋白,分别以NS1单抗和以上制备的多抗血清为一抗,进行Western blot分析。结果显示,NS1单抗为一抗,可染出48 kDa的NS1条带和56 kDa的NS1'条带;而以多抗血清为一抗,仅染出56 kDa的条带。上述结果显示,多抗血清识别的NS1'蛋白为NS1'移码后片段表达的蛋白。

分类号： S852.659.6

  • 相关文献

[1]双链RNA病毒的复制机制. 陈忠斌. 1995

[2]介导PRRSVORF1a/1b间程序性-1核糖体移码的刺激元件为假节结构. 韦祖樟,高飞,姜一峰,周艳君,袁世山,童光志. 2013

[3]乙型脑炎病毒E蛋白基因的原核表达及ELISA抗体检测方法的建立. 刘昊,尹革芬,鲁会军,张丹,谭磊. 2010

[4]乙型脑炎病毒NS1蛋白单克隆抗体的制备与鉴定. 王斌,田志军,华荣虹,刘天强,赵付荣,童光志. 2008

[5]乙型脑炎病毒E蛋白结构域Ⅲ的抗原表位鉴定. 闫丽萍,华荣虹,亓文宝,童光志. 2007

[6]猪乙型脑炎病毒SH0601株基因组序列测定与分析. 郑浩,余丹丹,孙志,高飞,袁世山. 2007

[7]乙型脑炎病毒致弱株的筛选及其生长特性. 郑浩,郑旭晨,郭亦非,童武,刘飞,张青占,单同领,童光志. 2013

[8]猪日本乙型脑炎病毒DNA复制子载体的构建及外源基因表达分析. 王晓杜,赵凡凡,代兵,邵东华,蒋春英,周圻,马志永. 2015

[9]乙型脑炎病毒NS1'蛋白编码框的扩展对病毒毒力的影响. 郭亦非,郑浩,郑旭晨,童武,刘飞,梁超,单同领,于海,童光志. 2014

[10]乙型脑炎病毒SH0601株基因组序列分析及全长cDNA克隆的构建. 郑浩,孙志,袁世山. 2007

[11]乙型脑炎病毒NS1蛋白的可溶性表达与抗原性分析. 刘立科,陈振师,任玉红,步志高,华荣虹. 2012

[12]日本脑炎病毒E Ⅲ结构域蛋白的表达及多克隆抗体的制备与鉴定. 沈强,魏建超,史子学,常维山,赵凡凡,蒋春英,王水明,马志永. 2013

[13]乙型脑炎病毒E蛋白抗原表位多肽序列鉴定及分析. 陈娜莎,华荣虹,闫丽萍,赵付荣,王斌,杜鹃,王云峰,童光志. 2011

[14]流行性乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体的制备与鉴定. 赵付荣,华荣虹,王斌,陈娜莎,阿合买提·买买提,步志高. 2010

[15]宿主菌株及培养温度对乙型脑炎病毒cDNA克隆稳定性的影响. 郑旭晨,郑浩,童武,单同领,郭亦非,童光志. 2013

[16]乙型脑炎病毒反向遗传系统的构建. 郑浩,郑旭晨,郭亦非,童武,童光志. 2013

[17]马乙型脑炎病毒NS1基因的原核表达及抗原性鉴定. 田志革,郭巍,赵立平,李红梅,曲娟娟. 2011

[18]上海地区猪场蚊源乙型脑炎病毒MH-7和PD-19的分离鉴定及分子特征分析. 吴亚玲,魏建超,钟登科,陆莹梅,李蓓蓓,刘珂,邵东华,邱亚峰,黄克和. 2016

[19]日本脑炎病毒EⅢ结构域蛋白的表达及多克隆抗体的制备与鉴定. 沈强,魏建超,史子学,常维山,赵凡凡,蒋春英,王水明,马志永. 2013

[20]猪源乙型脑炎病毒HEN0701株全基因组分子特征分析. 郑浩,邓宇,袁世山. 2010

作者其他论文 更多>>