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烟草脆裂病毒介导的人参基因沉默体系的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 李冉琪;李雅淑;汤淼淼;曲正义;郑培和;侯微

作者机构：

关键词： 病毒诱导的基因沉默;人参;八氢番茄红素脱氢酶;烟草脆裂病毒;农杆菌

期刊名称：中草药

ISSN： 0253-2670

年卷期： 2024 年 55 卷 01 期

页码：

收录情况： 北大核心（2023版） ; ; CSCD（2023-2024年度） ; ; 科技核心（2024版）

摘要： 目的 人参Panax ginseng中构建烟草脆裂病毒（tobacco rattle virus,TRV）介导的基因沉默体系，为人参中基因功能的验证提供新方法。方法 通过序列比对得到人参中八氢番茄红素脱氢酶（phytoene desaturase,PDS）基因的完整序列，利用保守结构域预测工具得到核心片段，将其整合进pTRV2载体内。重组载体转化农杆菌后侵染人参叶片，观察表型并利用q PCR检测沉默效率。结果 通过序列比对得到了2条PDS基因。PgPDS1基因c DNA序列全长1 746 bp，编码581个氨基酸；PgPDS2基因c DNA序列全长1299bp，编码432个氨基酸。2个PgPDS蛋白均具有典型的PDS结构域。将重组载体通过农杆菌转化人参叶片，接种3周后叶片表型无变化，5周后叶片尖端以及边缘出现枯萎现象。经q PCR检测，接种后3周和5周人参内源PgPDS基因表达量分别下降至接种前的70.37%和37.35%，表明体系构建成功。结论 人参中成功构建了TRV介导的基因沉默体系。

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