数字农科院2.0

甘蔗DⅢ家族蔗糖磷酸合成酶基因SofSPSDⅢ克隆及其hpRNA载体构建

文献类型： 中文期刊

作者： 李双喜;桂意云;秦翠鲜;陈忠良;廖青;李杨瑞;黄东亮

作者机构：

关键词： 甘蔗;蔗糖磷酸合成酶;SofSPSDⅢ;克隆;发夹RNA;载体构建

期刊名称：南方农业学报

ISSN： 2095-1191

年卷期： 2014 年 45 卷 04 期

页码： 12-19

收录情况： CSCD

摘要： 【目的】克隆甘蔗DⅢ家族SofSPSDⅢ基因并构建其hpRNA表达载体,为研究该基因生物学功能奠定基础。【方法】通过同源克隆获得甘蔗SofSPSDⅢ基因部分序列,利用RACE技术获得其全长cDNA。扩增SofSPSDⅢ目的基因约500 bp序列,利用中间载体pHANNIBAL构建该片段的hpRNA结构,然后用Not Ⅰ将整个hpRNA结构切下,克隆到双元植物表达载体pART27上,构建该基因的hpRNA表达载体。【结果】通过同源克隆和RACE技术获得SofSPSDⅢ基因全长cDNA序列,该基因全长3252 bp,5′端UTR长度59 bp,3′端UTR长度292 bp,开放阅读框(ORF)长度2895 bp,带有真核生物典型的poly(A)尾巴(GenBank登录号:HQ117935)。该基因编码蛋白含有964个氨基酸,理论分子量108.03kDa,等电点pI=6.66;SofSPSDⅢ与SoSPS2、SbSPS和TaSPS9的氨基酸序列同源性分别为99.0%、98.9%和90.0%。构建获得SofSPSDⅢ基因的hpRNA载体pART-DⅢ-Ri。【结论】成功克隆甘蔗DⅢ家族SofSPSDⅢ基因并构建基hpRNA载体,可为下一步沉默该基因、进而解析该基因的生物学功能奠定基础。

分类号： S566.1

  • 相关文献

[1]甘蔗B家族蔗糖磷酸合成酶基因SofSPSB的克隆及原核表达. 秦翠鲜,陈忠良,桂意云,李双喜,汪淼,廖青,李杨瑞. 2013

[2]甘蔗工艺成熟期SS和SPS酶活性与糖分积累的相关性研究. 黄静丽,赵文慧,杨丽涛,李杨瑞. 2015

[3]甘蔗蔗糖磷酸合成酶基因(SofSPSA)的克隆及正反义植物表达载体的构建. 方锋学,黎涛,李双喜,廖青,李杨瑞. 2011

[4]甘蔗各家族SPS基因表达特性分析. 汪淼,秦翠鲜,陈忠良,廖青,李杨瑞,黄东亮. 2016

[5]甘蔗蔗糖磷酸合成酶SPSⅢ基因表达的初步研究. 黄诚梅,潘有强,魏源文,邓智年,秦新民,李杨瑞. 2012

[6]甜菜蔗糖磷酸合成酶基因的克隆及序列分析. 刘大丽,马龙彪,郝慧. 2010

[7]甜高梁蔗糖磷酸合成酶基因(SPS3-1)的克隆与序列分析. 刘洋,顿宝庆,张保明,路明,李桂英. 2011

[8]甜高粱蔗糖磷酸合成酶基因(SPS3-1)的克隆与序列分析. 刘洋,顿宝庆,张保明,路明,李桂英. 2011

[9]水牛PTHLH基因克隆分析及其真核表达载体构建. 陆杏蓉,梁莎莎,邓廷贤,段安琴,马小娅,庞春英,梁贤威. 2018

[10]水牛STAT4基因克隆分析及其真核表达载体的构建. 朱鹏,庞春英,段安琴,邓廷贤,陆杏蓉,梁贤威. 2016

[11]猪防御素PBD-1基因的克隆及其表达载体构建. 彭章华,苗向阳,郑鸿培,潘清琴. 2005

[12]J亚群禽白血病Hrb-1分离株env基因克隆及gp85杆状病毒表达载体的构建. 付朝阳,宋素泉,高宏雷,王笑梅,郭艳,王英,张厚双,尹训南,童光志. 2004

[13]甘蔗基因克隆研究进展. 李双喜,廖青,方锋学,李杨瑞. 2012

[14]甘蔗脱落酸胁迫成熟诱导蛋白基因(SoASR)的克隆和表达分析. 杨丽涛,张保青,宋修鹏,李杨瑞. 2013

[15]桂糖11号Rubisco基因克隆、原核表达及纯化. 蒋媛,王露蓉,顾彩彩,牛俊奇,孙波,李杨瑞,杨丽涛. 2016

[16]甘蔗S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因(ScSAM)的克隆及表达. 张保青,黄杏,杨丽涛,李杨瑞. 2014

[17]甘蔗内生固氮菌Klebsiella variicola DX120E nifH基因的克隆与序列分析(英文). 牛俊奇,魏春燕,邢永秀,杨丽涛. 2014

[18]甘蔗核苷二磷酸激酶(NDPK1)基因克隆及表达分析. 李杨瑞,杨丽涛. 2012

[19]甘蔗乙烯受体Sc-ERS启动子的克隆与序列分析. 牛俊奇,朱惠,杨丽涛,李杨瑞,王爱勤. 2013

[20]甘蔗光合系统Ⅰ psaD基因的克隆和表达分析. 王爱勤,朱惠,杨丽涛,李杨瑞. 2014

作者其他论文 更多>>