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葡萄根瘤蚜TaqMan-MGB实时荧光定量检测方法的研究

文献类型： 中文期刊

作者： 王忠跃;孔繁芳;武艳霞

作者机构：

关键词： 葡萄根瘤蚜;TaqMan-MGB;实时荧光定量PCR

期刊名称：植物保护

ISSN： 0529-1542

年卷期： 2012 年 38 卷 02 期

页码： 108-113

收录情况： 北大核心

摘要： 为建立葡萄根瘤蚜实时荧光定量PCR的检测方法,参考Karen Herbert等设计的特异性引物与TaqMan-MGB荧光探针,构建以标准阳性质粒作为标准品制作标准曲线,并经优化反应条件,建立葡萄根瘤蚜的实时荧光PCR绝对定量检测方法,进行敏感性和重复性试验,并对受葡萄根瘤蚜为害的葡萄根际土壤进行初步定性检测。结果表明:该方法的灵敏度可达1.625拷贝/μL,3次重复检测的变异系数均小于5%。提取0.25g含有10头葡萄根瘤蚜若虫土壤的DNA,并将其梯度稀释,用建立的荧光定量PCR进行检测,将DNA稀释103倍后,仍能检测出阳性结果。对受害葡萄根际土壤检测结果为阳性。葡萄根瘤蚜TaqMan-MGB探针实时荧光PCR检测技术具有特异性强,敏感性高,易操作等优点,有很好的应用前景和研究价值。

分类号： S436.631.21

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