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鉴别大肠杆菌O 8 /O 9 血清型双重PCR方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 朱红;李妍;魏娟文;张耀东;王瑶;陶程琳;AFAYIBO Dossêh Jean Ap?tre;李涛;祁晶晶;田明星;丁铲;于圣青;王少辉

作者机构：

关键词： 大肠杆菌;O8;O9;血清型;双重PCR

期刊名称：中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2021 年 51.0 卷 5.0 期

页码：

收录情况： 北大核心（2020版） ; CSCD（2020-2021年度） ; 农林核心（2020版） ; 科技核心（2020版）

摘要： 为了建立一种能鉴定大肠杆菌O8、O9血清型的高效、快速的双重PCR方法,参考Gen Bank中大肠杆菌O8、O9血清型的O抗原合成基因簇序列筛选特异性靶标基因并设计合成2对PCR引物,通过优化反应条件,分析双重PCR方法的特异性、敏感性,通过检测大肠杆菌临床分离株验证双重PCR的实用性。结果显示,所建立的双重PCR方法可有效鉴定O8、O9血清型大肠杆菌,对其他血清型大肠杆菌及菌株则无交叉反应,表明PCR方法的特异性好;O8和O9血清型的菌体最低检出限分别为1×103CFU/m L和1×104CFU/m L,其DNA最低检出限分别为10 pg/μL和500 pg/μL。临床分离菌株检测显示,双重PCR检测结果与传统血清凝集结果一致。结果表明,本研究建立的双重PCR方法可有效、特异、灵敏、快速鉴定大肠杆菌O8、O9血清型,为大肠杆菌O8、O9血清型检测及其流行病学调查提供了新的技术手段。

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